【摘 要】
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以薄壳品种‘纸皮’扁桃和厚壳品种‘长石头’扁桃为试材,组化分析内果皮发育过程中组织结构变化规律、生理测定内果皮中主要成分相关内含物质含量的动态差异,克隆两个扁桃品
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以薄壳品种‘纸皮’扁桃和厚壳品种‘长石头’扁桃为试材,组化分析内果皮发育过程中组织结构变化规律、生理测定内果皮中主要成分相关内含物质含量的动态差异,克隆两个扁桃品种内果皮木质素合成相关MYB46基因,生物信息学分析其序列特征、预测其生物学功能,并比较分析两个基因的表达模式,以探明扁桃内果皮木质素积累规律及木质素合成相关MYB46基因在内果皮木质素积累过程中的作用,为扁桃的遗传改良奠定基础。主要试验结果如下:(1)‘长石头’扁桃内果皮发育过程中细胞直径、细胞层数均在持续上升,且明显大于‘纸皮’;‘长石头’内果皮被间苯三酚染液所染范围多于‘纸皮’,‘纸皮’和‘长石头’扁桃内果皮均在持续木质化,木质化方式分别为从内果皮内至其外和两侧向中间。‘纸皮’和‘长石头’扁桃的整个内果皮发育过程分别约为75 d和90 d;‘长石头’扁桃中、内果皮界线出现比‘纸皮’早15 d,‘长石头’扁桃内果皮发育完成比‘纸皮’扁桃晚15 d。扁桃内果皮细胞的发育分为内果皮发育前期、内果皮快速发育期、内果皮基本形成3个时期,扁桃内果皮细胞发育和次生细胞壁加厚伴随着木质素的积累。(2)‘纸皮’和‘长石头’两个扁桃品种内果皮在不同发育时期木质素和纤维素含量均呈现上升趋势,而酚类物质呈现下降趋势;‘长石头’扁桃内果皮的木质素和纤维素含量分别在花后55 d和40 d起始终高于‘纸皮’,但酚类物质含量始终低于‘纸皮’;扁桃内果皮木质素与纤维素含量呈现正相关的关系,而与酚类物质含量呈现负相关的关系;两个扁桃品种PAL、CAD、C4H、PPO、POD活性变化趋势一致,但峰值时间和活性的大小不同。厚壳‘长石头’扁桃较高的PAL、CAD、C4H、PPO、POD活性和大量的木质素合成的前体物质促进了木质素的积累,内果皮木质化程度较薄壳‘纸皮’高。(3)将克隆的两个扁桃品种内果皮中木质素合成相关MYB46基因分别命名为Ac MYB46-z和Ac MYB46-c,两个基因全长均为1 380 bp,ORF均为1 017 bp,均编码338个氨基酸,蛋白的相对分子质量分别为37.36 k Da和38.77 k Da;两个扁桃品种MYB46蛋白均为水溶性不稳定、混合型非分泌蛋白;两个基因在扁桃内果皮各个发育时期均有表达,且在木质素快速积累时期MYB46基因相对表达量较高,Ac MYB46-z的相对表达量达到高峰之后,相对表达量均显著低于Ac MYB46-c,MYB46基因参与调控扁桃内果皮木质素的代谢。
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