论文部分内容阅读
超大孔聚合物PGMA微球具有疏水性,容易与蛋白发生非特异性吸附使其失去活性,且制备的微球载量较低。笔者针对这一问题进行如下探究:PGMA微球作为基材,在有机溶剂DMSO中通过环氧基在其表面接枝葡聚糖,然后通过烯丙基活化方法在碱溶液中多次镀层葡聚糖,使其表面含有大量亲水性基团OH,从而达到亲水改性的目的。然后通过红外光谱仪、扫描电镜和原子力显微镜对改性前后微球的化学组成和形貌进行表征;红外表征表明葡聚糖接枝到微球上,扫描电镜和原子力显微镜表明改性后微球形貌未发生改变;非特异性吸附结果表明,改性前后,其非特异性吸附由原来的60%左右变为2%左右,与亲水性的琼脂糖微球的非特异性吸附相近,接触角从153°降低到约为0°,亲水性良好。用亲水改性的PGMA微球通过环氧氯丙烷环氧活化连接耐碱ProteinA亲和配基,制备成亲和层析介质,并对其制备条件进行优化,对其载量和性能进行表征。扫描电镜和压力-流速曲线测试表明改性前后其流通性能变化不大。考察了环氧值、配基密度及载量之间的关系,结果表明配基密度随着环氧值的增大而增大、载量随着配基密度的增大先增大后减小,在配基密度为4.52 mg/mL时,其动态载量达到最大值,为16.1 mg/mL。考察其在不同保留时间下介质的动态载量,结果显示,随着保留时间从5 min缩短到1 min,介质的动态载量仅仅下降13%,表明其在快速分离纯化上有一定的潜力。用亲水改性的PGMA微球连接DEAE阴离子交换配基,制备成阴离子交换介质,并对其改性前后的形貌进行表征。结果表明,改性前后微球形貌未改变。并考察了孔径、配基密度对其动态载量的影响。结果表明,随着孔径的增大,载量变小,而随着配基密度的增加,介质的载量先增大后减小。还考察其在不同保留时间下介质的动态载量,结果显示,随着保留时间从5 min缩短到1 min,介质的动态载量仅仅下降18%,表明其在快速分离纯化上有一定的潜力。