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本文以仿刺参(Apostichopus japonicas)为研究对象,在基础饲料中添加不同水平的包膜亮氨酸(Leu),研究其对仿刺参幼参生长、消化酶及免疫相关酶活性的影响,探究仿刺参幼参对饲料中亮氨酸的最适需求量。其后,在仿刺参幼参对Leu和异亮氨酸(Ile)最适需求量已知的条件下,通过在饲料中添加3个水平的包膜Leu和3个水平的包膜Ile,探究饲料中Leu和Ile交互作用对仿刺参幼参生长及生理代谢的影响。实验结果可为研究仿刺参配合饲料中氨基酸的合理配比提供参考依据。具体研究结果如下:在基础饲料中分别添加0、0.80%、1.60%、2.40%、3.20%和4.00%的包膜Leu,配成Leu实际含量分别为1.29%(D1,对照组)、1.63%(D2)、1.98%(D3)、2.22%(D4)、2.58%(D5)和2.97%(D6)的6组实验饲料,饲喂初始体质量为(16.40±0.14)g的仿刺参幼参60 d,探究仿刺参幼参对Leu的最适需求量。结果显示:(1)随饲料Leu含量从1.29%提高到1.98%,仿刺参幼参的增重率(WGR)和特定生长率(SGR)显著升高,在D3组达到最大值100.84%,随Leu含量进一步提高,WGR和SGR显著降低;(2)随饲料Leu含量从1.29%提高到1.98%,仿刺参体壁的粗脂肪含量显著升高,在D3组达到最大值5.50%,且显著高于其他组,随Leu含量进一步提高,仿刺参体壁粗脂肪含量显著降低;(3)随饲料Leu含量的提高到,仿刺参肠道脂肪酶和蛋白酶活性呈先升高后降低趋势,D3组脂肪酶活性显著高于其他组,D2、D3和D4组蛋白酶活性显著高于其他组;(4)随饲料Leu含量从1.29%提高到1.98%,仿刺参肠道谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性和总抗氧化能力(T-AOC)显著升高,超过1.98%后,AST活性趋于平稳,而ALT活性和T-AOC显著降低,D3组ALT活性显著高于其他组,D3组T-AOC显著高于D1、D2、D5和D6组;随饲料Leu含量从1.29%提高到1.98%,仿刺参肠道丙二醛(MDA)含量显著降低,当饲料Leu含量超过2.22%后,MDA含量显著升高,D3和D4组MDA含量显著低于其他组。研究表明,以WGR为评价指标,经一元二次回归分析(y=-15.843x2+66.802x+28.633)得出,体质量为16.40 g的仿刺参幼参对饲料中Leu的最适需求量为2.11%(10.37%饲料粗蛋白)。为探究饲料中Ile和Leu交互作用对仿刺参生长、消化及免疫性能的影响,在基础饲料中分别添加0、0.80%、1.60%的包膜Ile,在各Ile添加水平中再分别添加0、1.60%、3.20%的包膜Leu,配成3个Ile水平与3个Leu水平交互的9组等氮等脂实验饲料,低(low,L)、中(middle,M)、高(high,H)Ile水平与低、中、高Leu水平交互分组分别命名为LI-LL(0.52%Ile,1.29%Leu)、LI-ML(0.59%,1.98%)、LI-HL(0.56%,2.58%)、MI-LL(0.91%,1.33%)、MI-ML(0.97%,1.95%,对照组)、MI-HL(0.93%,2.68%)、HI-LL(1.30%,1.39%)、HI-ML(1.32%,1.99%)和HI-HL(1.31%,2.72%),饲喂初始体质量为(16.40±0.14)g的仿刺参幼参60 d。结果显示:(1)饲料中Ile和Leu对仿刺参的增重率和特定生长率的影响存在交互作用,其中Ile显著影响了仿刺参的增重率和特定生长率,而Leu极显著影响了仿刺参的WGR和SGR,HI-LL和MI-LL组WGR和SGR显著高于其他组;(2)饲料中Ile和Leu显著影响了仿刺参体壁粗脂肪含量,并且两者存在交互作用,HI-LL和LI-ML组粗脂肪含量显著高于其他组;饲料中Ile和Leu的交互作用极显著影响了仿刺参体壁苯丙氨酸含量;(3)饲料中Ile和Leu对仿刺参肠道淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶活性的影响均存在交互作用,HI-LL组淀粉酶活性有最大值,LI-ML组、MI-HL组和HI-LL组仿刺参肠道蛋白酶活性显著高于其他组,高Ile组脂肪酶活性显著高于中Ile组;(4)饲料中Ile和Leu对仿刺参肠道酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、AST和ALT活性的影响均存在交互作用;对照组ACP活性显著低于除HI-HL组外的其他组,AKP活性显著低于除LI-HL、HI-HL组外的其他组;AST和ALT活性均在HI-LL组有最大值且显著高于对照组;(5)饲料中Ile和Leu对仿刺参肠道T-AOC、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和MDA含量的影响均存在交互作用,HI-LL组T-AOC、SOD和CAT活性有最小值,HI-LL组MDA含量有最大值且显著高于其他组。本实验条件下,综合生长性能、体壁营养组成和消化酶活性来看,投喂高Ile与低Leu(HI-LL组)水平饲料的仿刺参幼参表现最佳。但此时仿刺参幼参抗氧化能力表现较差。为使仿刺参幼参具有较好的生长性能,同时具有较强的抗逆能力,建议仿刺参幼参饲料中Ile和Leu的含量分别为0.91%和1.33%(中Ile、低Leu水平)。