积极人畜交互对猪行为、福利、生产性能和肠道微生物的影响

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人畜关系是影响现代畜牧业生产的重要因素,也是影响农场动物福利的重要因素。人的态度和个性影响动物的行为,人表现出攻击性和恶劣态度会加深动物对人的恐惧程度,影响对动物的处理和管理,进而影响畜禽生产性能和福利水平。猪对人的恐惧程度高,通过慢性应激反应会限制猪的生长和生产性能。目前生产实践和现有文献大多探讨短期或者特定阶段的人畜交互操作对猪福利的影响,本研究则聚焦长期的积极人畜关系对猪生长和生产阶段的影响,研究积极人-猪交互对断奶到出栏育肥猪的生长性能,对妊娠和哺乳母猪的行为和生产性能的影响,进而揭示良好的人畜关系提高猪只福利的行为和生理的机制,以期找到一个简单易行的提高猪只福利的方法,为人畜交互在养猪生产实践中的应用提供理论支持。试验一,通过测定人畜交互经验动物的行为、生理和免疫反应,研究人畜交互方式的有效性。选择144头6周龄杂交民猪断奶仔猪(大白×杜洛克×民猪),分为交互组和对照组,每组9个重复,每个重复8头,交互组经过6周的人畜交互处理后,从每个重复中随机选择2头进行行为评分,并测试动物对不同试验员(熟悉人、陌生人)的行为反应(AA测试),测试后采用定点动物采样和瞬时记录法观察目标动物看向试验者、与试验者接触、躲避试验者、不与试验者接触等行为,采集行为反应测试期间的心率,并测定仔猪唾液皮质醇、分泌型免疫球蛋白A(s Ig A)、唾液淀粉酶(AMY)水平和血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、免疫球蛋白Ig A、Ig G、Ig M、白介素IL-1β、IL-2、IL-3、IL-6、IL-10的水平。试验结果表明:经过6周固定频率的接触,在陌生环境中,无论是熟悉人还是陌生人,交互组仔猪的AA测试评分、与试验者接触的次数都显著高于对照组(p<0.05),对照组则表达出更多的逃避行为和看向试验者行为(p<0.05),交互组和对照组仔猪面对熟悉人和陌生人的测试时AA测试评分、接触行为、看向试验者行为、逃避行为差异不显著(p>0.05),相对于陌生人交互组仔猪表现出更多的与熟悉人无接触行为(p<0.05),相对于熟悉人对照组仔猪表现出更多与陌生无接触行为,但差异不显著(p>0.05);交互组和对照组及其接受熟悉人和陌生人测试后的心率、皮质醇水平差异不显著(p>0.05),对照组仔猪受到熟悉人测试后唾液AMY水平低于陌生人(p<0.05),交互组仔猪受到熟悉人测试后唾液s Ig A、血清Ig M水平低于陌生人(p<0.05),而IL-6水平高于陌生人(p<0.05),交互组仔猪受到熟悉人测试后IL-6水平高于对照组(p<0.05),交互组和对照组的仔猪在行为反应试验中的血清TNF-α、IFN-γ、Ig A、Ig G、IL-1β、IL-2、IL-3和IL-10水平差异不显著(p>0.05)。试验二,探究长期(断奶到屠宰)积极交互对猪生产性能、肉质的影响。本试验分为两个阶段:保育期和育肥期。保育期选择144头6周龄杂交民猪断奶仔猪(大白×杜洛克×民猪),分为交互组和对照组,每组3个重复(9栏),每个重复8头,经过6周的人畜交互后记录生产性能,然后从每个重复随机选择3头转入育肥舍中的6个育肥栏中,分为交互组(3栏*9头)和对照组(3栏*9头),待猪群稳定后继续交互直到出栏,记录生产性能,然后从每组随机选择6头屠宰,测定胴体品质和肉品质。结果显示:保育期和育肥期两组间的平均日增重、平均日采食量和料肉比均不显著(p>0.05);在45min时交互组的b*值显著低于对照组(p<0.05);在2h时交互组L值显著高于对照组(p<0.05),两组间胴体品质和其他肉品质指标均不显著(p>0.05)。试验三,探索长期人畜交互对妊娠母猪行为、唾液生理和粪便微生物的影响。选择初产民猪杂交母猪、杜民母猪(杜洛克×民猪)72头,分成对照组(36头)和交互组(36头),每组6栏,每栏6头,交互组从母猪配种后第一天开始一直到转入产房(预产期前第7天)结束人畜交互刺激。在配种后的第25、45、65、85、105天每栏随机选择1头母猪观察并采集状态性行为和事件性行为,在行为采集第二天,每栏随机选择1头母猪进行唾液和粪便采集,检测唾液中皮质醇、s Ig A和AMY的水平和粪便微生物分析。结果显示:随试验时间增加,交互组和对照组站立行为、侧卧行为、俯卧行为分别呈现显著下降、上升、下降趋势(p<0.05),坐立行为时间效应差异不显著(p>0.05),在不同试验阶段,交互组和对照组站立、侧卧、俯卧、坐立行为比例差异不显著(p>0.05);随试验时间增加,交互组和对照组啃栏、探究行为呈现显著下降趋势(p<0.05),交互组无食咀嚼变化不显著(p>0.05),在不同试验阶段,交互组和对照组母猪站立、侧卧、俯卧、坐立行为比例差异不显著(p>0.05);交互组母猪啃栏行为次数在限位第45天显著低于对照组(p<0.05),在其他时间点,两者差异不显著(p>0.05),在不同的试验阶段,交互组和对照组母猪无食咀嚼、探究、修饰行为发生次数差异不显著(p>0.05);两组唾液皮质醇、AMY、s Ig A水平差异均不显著(p>0.05)。交互组与对照组的各项Alpha多样性指标在5个妊娠时间点上并没有显著的差异(p>0.05),对照组和交互组的粪便微生物Beta多样性在妊娠期第26、46天的差异显著(p<0.05)。厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和螺旋体门(Spirochaetes)的相对丰度分度在妊娠期第26、46、66、86和106天时两组间没有差异(p>0.05),对照组和交互组的颤螺菌属(Oscillospira)的丰度在整个妊娠期的差异显著(p<0.05)。试验四,妊娠期积极人畜交互对哺乳母猪行为、生理、初乳质量、生产性能和仔猪健康的影响研究。选择试验三交互组(34头)和对照组(32头)母猪作为交互组和对照组,研究妊娠期的积极人畜交互对哺乳期母猪和仔猪的影响,其中哺乳期不进行人畜交互。从每组中随机选择6头母猪,观察母猪产前24小时的筑巢行为、产后1-3天和第2-4周的状态性行为和姿势转换以及2-4周的哺乳行为,检测母猪分娩前2天,分娩后第2、5天粪便中催乳素和催产素浓度,检测初乳中的免疫球蛋白Ig A、Ig M、Ig G和乳铁蛋白(LTF)浓度,同时记录母猪生产性能。在产后30天从每组中随机选择5头仔猪屠宰,对仔猪的空肠、回肠、结肠、盲肠进行组织显微结构的观察、免疫因子和肠道屏障相关因子q RT-PCR和Western Blot检测以及微生物分析。结果显示:交互组和对照组母猪产前24h筑巢行为的发生次数差异不显著(p>0.05),筑巢行为在产前12h开始增加,在产前6h达到高峰,交互组和对照组母猪在产后3天内和2-4周的状态性行为表达、姿势转换的频率、哺乳行为表达差异不显著(p>0.05),但组内随时间的变化侧卧行为、哺乳行为呈现显著的下降趋势(p<0.05),其他状态性行为、姿势转换呈现显著的上升趋势(p<0.05)。交互组和对照组母猪在分娩前第2天和分娩后第2、5天催产素、催乳素水平差异不显著(p>0.05),交互组和对照组母猪初乳中Ig G、Ig A、Ig M和乳铁蛋白水平差异均不显著(p>0.05),交互组和对照组母猪生产性能及仔猪腹泻率差异不显著(p>0.05)。妊娠期有无人畜交互不会改变仔猪各个肠道内容物中微生物的多样性和组成(p>0.05),组间的组织结构无差异,妊娠期的积极人畜交互提高了仔猪空肠、回肠、结肠、盲肠的Claudin-1、Occludin、Mucin-2、ZO-1、TLR4的m RNA表达量(p<0.05),上调空肠、结肠、盲肠中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的m RNA表达量(p<0.05),下调回肠中IL-6的m RNA表达量(p<0.05)。结论:6周的人畜交互接触能够减少断奶仔猪对人的恐惧,仔猪更愿意接近人,增加与人的亲密度,但仔猪不能很好地区分出熟悉人和陌生人,虽然积极人畜交互对断奶仔猪生理和免疫的影响较小,但反应积极情感状态的s Ig A和IL-6在交互组仔猪唾液中水平较高;长期(从断奶到出栏)积极的人畜交互对育肥猪生产性能和胴体品质、肉品质影响不显著。短期(45天)的人畜交互后,妊娠母猪的啃栏行为、粪便微生物的多样性有显著影响,妊娠期积极的人畜交互对群养母猪行为、唾液生理免疫水平和粪便微生物组成影响不显著;交互组仔猪肠道屏障的作用提升,对哺乳母猪母性能力、初乳生理免疫及生产性能影响不显著,对仔猪影响有限。
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