【摘 要】
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目的:1.在胚胎鼠跖骨血管生成实验基础上,引入外源性的内皮祖细胞(EPCs),建立一种新型体外血管生成模型。研究者可通过此实验模型直接观察EPCs对胚胎鼠跖骨血管生成的影响,并
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目的:1.在胚胎鼠跖骨血管生成实验基础上,引入外源性的内皮祖细胞(EPCs),建立一种新型体外血管生成模型。研究者可通过此实验模型直接观察EPCs对胚胎鼠跖骨血管生成的影响,并借助于此实验模型可以更好地筛选或反应不同实验目标对EPCs活性的促进或抑制作用。2.探讨EPCs联合胚胎鼠跖骨血管形成实验模型中加入的EPCs的最适数量、模型的最适共培养时间。方法:1.分离、培养及扩增来源于6-8周龄的C57BL/6小鼠骨髓的内皮祖细胞(EPCs);2.从孕17.5天C57BL/6小鼠中分离提取胚胎鼠,无菌条件下将胚胎鼠跖骨取出;3.分别将数量为5×103、1×104、5×104、1×105的EPCs与胚胎鼠跖骨进行时间分别为12天、14天、16天的联合培养,并设空白对照组;4.CD31对胚胎鼠跖骨周围芽生管样结构进行免疫染色;5.用Image-Pro Plus 6.0对免疫染色阳性结果图像区域进行量化;6.SPSS 17.0分析处理数据并进行统计学分析。结果:1.利用全骨髓贴壁法结合差时贴壁法可有效分离和扩增EPCs细胞。2.EPCs联合胚胎鼠跖骨血管生成实验模型的最适共培养时间为14天。3.EPCs联合胚胎鼠跖骨血管生成实验模型中加入的EPCs相对最适数量为5×104。结论:初步构建了EPCs联合胚胎鼠跖骨血管生成实验模型,并实现对EPCs活性进行定量检测。
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