背景与目的：Cyclin Y(又叫CCNY)是近年来新发现的一种细胞周期蛋白，它在细胞周期调控及转录等过程中发挥重要作用，可能与肿瘤的发生发展密切相关。Cyclin X(又叫CCNX)是最近发现的一种Cyclin Y的同源异构体，缺失了Cyclin Y N端的1-54位氨基酸。现有的研究已证实Cyclin Y定位于细胞膜，而Cyclin X由于缺失N端的豆蔻酰化位点而失去膜定位，主要定位于细胞核。但是两者之间的关系及其对细胞功能的影响还尚未有文献报道。本研究通过在正常细胞及肿瘤细胞中高表达CCNY、CCNX及CCNY N端突变体CCNY(G2A)基因，探讨Cyclin Y和Cyclin X对正常细胞及肺癌细胞增殖的影响。方法：利用间接免疫荧光的方法研究A549、H1299及H446等5种肺癌细胞和HEK293正常细胞内两种异构体Cyclin Y与Cyclin X的表达；并构建真核表达质粒pEGFP-N1/CCNY、 pEGFP-N1/CCNX及pEGFP-N1/CCNY(G2A)，采用脂质体转染的方法获得Cyclin Y、Cyclin X及Cyclin Y (G2A)高表达的HEK293细胞株和肺癌细胞株；荧光显微照相、细胞间接免疫荧光及Western Blot方法鉴定各细胞株中Cyclin Y、Cyclin X及Cyclin Y (G2A)的定位及表达；细胞增殖实验比较三者对正常细胞系HEK293和肺癌细胞系H446、H1299细胞增殖的影响。结果：1.通过间接免疫荧光的方法未检测到Cyclin Y和Cyclin X在正常细胞HEK293中的表达，但二者在肺癌细胞系中高表达。结果还显示在不同的肺癌细胞中两种异构体的表达不同：在A549细胞中Cyclin Y和Cyclin X均有表达，而在H446细胞中主要表达Cyclin Y，另外在H1299、95D及95C细胞中主要表达Cyclin X。在以上所有的肺癌细胞中Cyclin Y和Cyclin X均与PFTK1共定位。2.本研究构建了真核表达质粒pEGFP-N1/CCNY、 pEGFP-N1/CCNX及pEGFP-N1/CCNY(G2A)并转染至正常细胞及肺癌细胞中，建立了Cyclin Y、Cyclin X及Cyclin Y (G2A)高表达的正常细胞株和肺癌细胞株。间接免疫荧光验证Cyclin Y定位于细胞膜，Cyclin X由于缺失Cyclin Y N端的豆蔻酰化位点主要定位于细胞浆和细胞核，而Cyclin Y N端的豆蔻酰化位点突变后也失去膜定位而主要分布于细胞浆和细胞核。3.细胞增殖实验显示失去膜定位的Cyclin Y(G2A)和Cyclin X可明显促进细胞的增殖，但是膜定位的全长Cyclin Y对细胞的增殖无明显的促进作用。结论：1.Cyclin Y和Cyclin X在肺癌细胞中高表达，且在不同细胞中两种异构体的表达不同，但是在本研究所用的全部肺癌细胞中Cyclin Y和Cyclin X与PFTK1共定位。提示Cyclin Y和Cyclin X在肺癌发展过程中可能发挥不同的功能。2.失去膜定位的Cyclin Y(G2A)和Cyclin X可明显促进正常细胞及肿瘤细胞的增殖。表明胞浆定位的Cyclin X可能是Cyclin Y发挥功能的形式，而膜定位的CyclinY可能不直接参与细胞周期的调控。3.深入研究CyclinY、Cyclin X与PFTK1的关系不仅有助于揭示肿瘤的发生机制，并可为肿瘤的防治提供一个新的视点。目的：转录因子X染色体偶联锌指蛋白（Zinc finger protein, X-linked）是锌指蛋白超家族中的一员，其编码基因ZFX位于哺乳动物X染色体上。现有的研究表明，ZFX在胚胎发育、细胞自我更新等生命过程中发挥着重要的作用。但是ZFX在肺癌发生发展中的功能尚不清楚。方法：运用Real-time PCR技术检测ZFX基因mRNA在8种肺癌细胞系和一种胚胎肺上皮细胞系中的表达水平；应用RNAi技术构建ZFX基因沉默细胞株，研究ZFX基因沉默后对非小细胞肺癌细胞系95D的增殖能力及细胞周期分布的影响；另外，外科手术获取49例NSCLC组织及配对肺癌旁组织，运用Real-time PCR技术检测NSCLC组织及相应癌旁组织中ZFX基因mRNA的表达。结果：ZFX基因mRNA在肺癌细胞系及肺肿瘤组织中高表达；在95D细胞中，ZFX基因沉默后不但抑制了肺癌细胞的增殖能力，而且使G0/G1期细胞明显增加；癌组织中ZFX的表达量/癌旁组织中ZFX的表达量（T/N）与肿瘤是否淋巴结转移具有统计学上的差异。结论：ZFX在非小细胞肺癌组织及肺癌细胞系中高表达；ZFX在肿瘤细胞增殖和细胞周期分布中发挥重要的功能；ZFX的表达量（T/N）与肿瘤是否淋巴结转移具有统计学上的差异。因此，ZFX很可能成为一个潜在的临床治疗靶点。