昆虫病原线虫共生菌中pirB基因的克隆与表达

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本文对昆虫病原线虫共生菌中pirB基因的克隆与表达进行了研究。文章用PCR方法从实验室保存的34个昆虫病原线虫共生菌株中扩增到了两个pirB基因。将这两个基因连接到pGEX载体上,并在大肠杆菌中进行诱导表达,得到了GST与PirB的融合蛋白。由于该融合蛋白以不溶的包涵体形式存在,不具有PirB蛋白的活性。所以对它进行了复性、提纯,并酶切掉了融合蛋白中的GST接头得到了可溶的PirB蛋白。用PirB蛋白对三种鳞翅目昆虫棉铃虫、斜纹夜蛾以及甜菜夜蛾的二龄幼虫进行了口服毒力测定,发现PirB蛋白对以上三种试虫均没有毒性。这一结果说明PirB蛋白单独表达可能没有杀虫活性。
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