【摘 要】
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目的:探讨OTUB2与YAP1/TAZ在ESCC增殖、侵袭及迁移中的作用,为ESCC的发展及临床治疗寻找新的肿瘤标志物及药物靶点。方法:（1）利用生物信息学公共数据库UALCAN、Gene MANIA数据库分析OTUB2在食管癌和癌旁组织中的表达以及与YAP1/TAZ之间的相互作用关系;组织水平使用免疫组织化学法检测组织芯片中183例食管鳞癌及相应癌旁组织中OTUB2、YAP1、TAZ与CTGF的
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目的:探讨OTUB2与YAP1/TAZ在ESCC增殖、侵袭及迁移中的作用,为ESCC的发展及临床治疗寻找新的肿瘤标志物及药物靶点。方法:（1）利用生物信息学公共数据库UALCAN、Gene MANIA数据库分析OTUB2在食管癌和癌旁组织中的表达以及与YAP1/TAZ之间的相互作用关系;组织水平使用免疫组织化学法检测组织芯片中183例食管鳞癌及相应癌旁组织中OTUB2、YAP1、TAZ与CTGF的蛋白表达,分析其表达与ESCC患者临床病理参数及生存预后之间的关系;（2）细胞水平通过Western blot实验检测OTUB2在三种食管鳞癌细胞株中蛋白表达,筛选出OTUB2蛋白表达最高的食管鳞癌细胞株进行慢病毒转染敲降OTUB2的表达,q RT-PCR与Western blot验证敲降效率,同时检测YAP1、TAZ、CTGF的m RNA及蛋白表达;CCK-8细胞增殖实验、平板克隆形成实验、细胞周期及凋亡检测实验、划痕愈合实验、Transwell迁移及侵袭实验,观察OTUB2在食管鳞癌细胞增殖、侵袭及迁移中的作用。结果:（1）生物信息学数据库检索分析发现OTUB2在食管癌中的表达明显高于癌旁组织,并且与YAP1/TAZ存在相互作用关系;免疫组织化学结果显示,OTUB2、YAP1、TAZ、CTGF均在ESCC组织中高表达,在癌旁组织中低表达（P＜0.05）,差异具有统计学意义;OTUB2高表达主要与患者的肿瘤大小（P=0.003）和分化程度（P=0.037）有关;YAP1高表达主要与患者的肿瘤大小（P=0.011）、分化程度（P=0.037）、病理分期（P=0.027）和淋巴结转移（P=0.001）有关;TAZ高表达主要与患者的肿瘤大小（P＜0.001）、浸润深度（P=0.020）、病理分期（P＜0.001）和淋巴结转移（P=0.001）有关;CTGF高表达主要与患者的肿瘤大小（P=0.001）、淋巴结转移（P=0.008）有关。Spearman相关分析显示,OTUB2分别与YAP1（P＜0.001;r=0.374）、TAZ（P＜0.001;r=0.271）、CTGF（P=0.003;r=0.216）存在关联,且呈正相关;生存分析提示,在ESCC患者中肿瘤直径≥3cm、有淋巴结转移及OTUB2、YAP1、TAZ、CTGF蛋白阳性表达的OS值较小（P＜0.05）;（2）Western blot本底实验结果显示,OTUB2在KYSE150细胞中蛋白表达量最高（P＜0.05）;细胞功能学实验结果提示,食管鳞癌细胞株KYSE150的增殖、侵袭及迁移能力在敲低OTUB2表达后均降低（P＜0.05）;细胞周期实验结果显示,敲低OTUB2表达后S期细胞减少,细胞明显阻滞于G2/M期（P＜0.05）;细胞凋亡结果显示,敲低OTUB2后KYSE150细胞凋亡率增高（P＜0.05）;q RT-PCR结果显示,敲低KYSE150细胞株中OTUB2的表达后,YAP1、TAZ、CTGF的m RNA表达水平无显著变化（P＞0.05）;Western blot结果提示,敲低KYSE150细胞株中OTUB2的表达后,YAP1、TAZ、CTGF的蛋白表达水平均降低（P＜0.05）。结论:OTUB2在食管鳞癌中呈高表达且与ESCC患者的生存预后有关;其可能通过调控YAP1和TAZ的蛋白表达进而促进食管鳞癌的增殖、侵袭及迁移。
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