外源性FHIT基因对奥曲肽诱导胃癌细胞MGC-803凋亡的影响

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目的:本课题通过建立稳定表达FHIT蛋白的人胃癌MGC-803细胞株,探讨外源性FHIT基因表达对奥曲肽诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡的影响及探讨其作用机制。方法:用脂质体法将pRc/CMV-FHIT质粒和空载体转入该基因表达缺失的人类胃癌系MGC-803细胞中,Western blot对获得G418抗性的细胞鉴定FHIT蛋白的表达,随后使用不同浓度的奥曲肽(octreotide, OCT)分别处理各组细胞,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)显色法检测分析细胞增殖情况,western blot法检测细胞Bcl-2和Bax的表达,流式细胞分析技术检测细胞调亡。结果: (1)成功建立稳定表达FHIT蛋白的MGC-803细胞株,Western Blot法检测证实FHIT蛋白表达。(2)奥曲肽处理胃癌细胞后,出现细胞增殖抑制,呈剂量依赖性和时间依赖性。(3)奥曲肽处理48h后,转染FHIT基因组细胞凋亡率(26.777%±1.702%)与染空载体细胞(13.8%±0.511%)及空白组细胞的凋亡率(12.634%±0.479%)相比明显增高(F =245.789,P <0.05,);(4)转染FHIT基因组细胞经奥曲肽处理后Bcl-2蛋白表达减少,Bax蛋白表达增加。结论:外源性FHIT基因表达与奥曲肽可协同促进胃癌细胞MGC-803凋亡,其机制可能与BCL-2家族中的凋亡相关蛋白改变有关。
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