绿僵菌生物学及对卵圆齿爪鳃金龟致病力研究

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卵圆齿爪鳃金龟HolotrichiaovataChang在我国南方是严重为害草坪的重要害虫之一。本论文以卵圆齿爪鳃金龟为对象,筛选高致病力绿僵菌Metarhiziumanisopliae(Metsch.)Sorokin菌株、测定菌株对蛴螬各龄期的致病效果、研究菌株生物学特性及绿僵菌毒素和绿僵菌分生孢子对蛴螬的联合致病效果。研究结果如下: (1)提出绿僵菌高致病力菌株筛选的三步法。首先分别采用12株绿僵菌(包括6株原始菌株和6株经过诱变得到的菌株)的孢子粉对3龄蛴螬进行接种,筛选出了6株感染率达到100%的菌株,其中包括4株原始菌株和2株诱变菌株。其中诱变菌株需要的侵染时间较长,致病力较弱。然后对上述6株菌进行菌株生长速度、孢子萌发率、产孢量以及对一龄蛴螬的致病效果测验,结果表明,除了菌落生长速率差异较小之外,平均产孢量和孢子萌发率均有显著差异,而且同一菌株的各种性状在一定程度上均表现出一致性,如M007-2、MQl0-7P菌株的生长速度、产孢量、萌发率以及对一龄蛴螬的致病力4项测验指标均高于其它4株菌;最后采用不同浓度的MQ07-2、MQl0-7P的孢子粉毒土分别对3个不同龄期的蛴螬进行致病力实验,结果表明菌株M007-2为符合筛选要求的高致病力菌株。 (2)蛴螬的死亡率分别与绿僵菌接种时间和接种的浓度呈正相关。绿僵菌对不同龄期蛴螬的致病力效果不同,其敏感顺序为1龄幼虫>2龄幼虫>3龄幼虫;MQ07-2菌株对1龄幼虫在lld的致死中浓度LCso为2.02×105孢子/克土,对2龄幼虫在12d的致死中浓度LCso为3.59×106孢子/克土,对3龄幼虫在16d时致死中浓度LC50为5.71×106孢子/克土;在5×106孢子/克土的浓度处理蛴螬1龄、2龄和3龄时,MQ07-2菌株LT$0分别为7.34d、12.02d和17.85d,即随着龄期的增加,潜育期有所延长,对绿僵菌的敏感性降低。 (3)温度和营养条件对金龟子绿僵菌的生物学特性均有较大影响。在23-26℃的温度范围内,菌落生长速度和产孢量均随着温度的升高而增大,但在29-32~C的温度变化中,却是随着温度的升高而降低,即在26℃时,各项生物学指标均达到最高。在不同培养基条件下菌株生长速度和产孢量的测定中表明,在供试的5种培养基(PDA、SDAY、SMAY、PPDA、Czapek)中,在PPDA培养基中,菌落生长最快,但产孢量是在SDAY培养基中最高,PPDA中次之,所以PPDA培养基为最适合该菌株生长的培养基,而SDAY培养基为最适合产孢的培养基。 (4)绿僵菌毒素对于绿僵菌菌落生长无影响,对于绿僵菌的致病力效果明显增强,在孢子浓度不变时,增加毒素浓度,致病力显著提高。且随着加入绿僵菌毒素浓度的增加,致病力越强,当毒素浓度达到2∞mg/L时,致病力达到了97.7%,表明绿僵菌毒素与绿僵菌分生孢子对蛴螬的的联合作用与其毒素浓度呈正相关。
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