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研究背景多囊卵巢综合征(PCOS)是育龄期妇女常见的生殖内分泌疾病,常表现为月经失调、卵巢多囊样改变和高雄激素血症,其远期并发症有肥胖、2型糖尿病和心血管疾病等。慢性肾脏病的发生与上述代谢性疾病密切相关,蛋白尿是其早期临床表现之一。据报道超过50%的PCOS患者出现与代谢综合征相关的微量白蛋白尿,提示PCOS可能与肾损伤相关,但其机制尚不清楚。高雄激素血症不仅是PCOS的临床表现,亦可增加PCOS代谢异常的发生风险,且已有研究表明血清雄激素水平升高与肾小管性蛋白尿发生密切相关。因此推测雄激素可能在PCOS相关性肾损伤中发挥重要作用。研究目的探讨血清睾酮在PCOS相关性肾损伤中的作用及机制。研究方法一、血清睾酮与PCOS患者肾损伤的关系研究1.收集55例PCOS患者及69例健康对照者的尿液标本,利用自动特异性蛋白质分析仪检测尿微量白蛋白(UACR)、尿k轻链蛋白(urinary k-light Chains,KapU)、尿λ轻链蛋白(urinary λ-light Chains,LamU)、尿 α1-微球蛋白(urinaryα1-microglobulin,α1-MU)及尿β2-微球蛋白(urinary β2-microglobulin,β2-MU)浓度,用尿肌酐标准化后进行组间比较和相关分析。2.收集PCOS伴有高雄激素血症患者、PCOS无高雄激素血症患者及健康对照者的卵泡液和颗粒细胞,每组各5例。采用电化学发光法检测卵泡液中睾酮浓度,qRT-PCR检测颗粒细胞中Caspase 3及NLRP3的mRNA表达情况。二、PCOS患者卵泡液对人肾小管上皮细胞纤维化的影响利用PCOS伴有高雄激素血症患者的卵泡液,刺激人近端肾小管上皮细胞(HKC-8细胞)。采用Western blot检测HKC-8细胞中纤维连接蛋白(fibronectin,FN)及α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达情况,免疫荧光法检测FN的表达情况,并以正常妇女的卵泡液做对照。研究结果一、血清睾酮与PCOS患者肾损伤的关系研究1.PCOS组中UACR较对照组明显升高,提示PCOS与肾损伤的发生相关。2.PCOS组中KapU、LamU、α1-MU和β2-MU与血清睾酮浓度均呈正相关,提示血清睾酮与PCOS肾小管损伤相关。3.在PCOS高雄激素组,卵泡液中的睾酮浓度较对照组及PCOS正常雄激素组显著升高,且颗粒细胞中Caspase3及NLRP3的mRNA水平最高,提示睾酮与PCOS颗粒细胞凋亡及炎症发生相关。二、PCOS患者卵泡液对人肾小管上皮细胞纤维化的影响Western blot结果表明PCOS伴有高雄激素的卵泡液处理后HKC-8细胞中FN和α-SMA表达显著上调;免疫荧光法检测结果也显示FN的表达显著上调。提示高水平的睾酮可诱导HKC-8细胞纤维化的发生。研究结论1.PCOS与肾损伤的发生相关。2.血清睾酮在PCOS相关性肾损伤中发挥重要的作用。3.睾酮可通过促进肾小管上皮细胞纤维化,介导PCOS相关性肾损伤的发生。