VPS34泛素化机制研究及其与阿尔兹海默病关系探讨

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VPS34(Vacuolar protein-sorting 34)在自噬和内体转运中发挥了重要的作用。在AD患者脑组织及其病理模型鼠APP/PS1小鼠脑组织中,VPS34激酶活性降低,并且VPS34会影响APP内吞转运。提示VPS34与AD发病机制有关。我们推测VPS34泛素化会改变其蛋白水平。但是,我们研究发现VPS34泛素化并不影响其蛋白水平。使用泛素野生型质粒及其各位点突变质粒与VPS34瞬时共转染HEK293细胞,发现VPS34可以发生各种类型的多聚泛素化修饰。泛素野生型及各突变位点质粒转染HEK393细胞,内源性VPS34蛋白水平没有改变。并且,我们发现VPS34既可以通过蛋白酶体也可以溶酶体途径降解,使用蛋白酶体抑制剂MG132或溶酶体抑制剂氯喹的干预下,VPS34蛋白水平在12和18小时没有改变,但在24小时明显升高,表明VPS34在18小时内相对稳定。在6、12月龄APP/PS1小鼠脑组织中,Vps34蛋白水平保持不变,但是VPS34的泛素化水平明显降低,表明VPS34的泛素化和蛋白水平的改变在APP/PS1小鼠中不一致。这些结果表明VPS34泛素化修饰不改变其蛋白水平。
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