血浆输注对肝衰竭患者及D-GalN/LPS所致急性肝衰竭小鼠的保护效应及机制研究

来源 :温州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ti110
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目的:  探讨血浆输注对肝衰竭患者及D-GalN/LPS所致急性肝衰竭小鼠的保护效应及其机制。  方法:  1.收集36例肝衰竭患者血浆输注前后的血液样本,检测血浆输注前后的凝血功能、肝功能及细胞因子IL-6。  2.选取60只ICR小鼠,随机分成3组。生理盐水对照组:通过腹腔注射100μl生理盐水;D-GalN/LPS组:以D-GalN 500mg/kg、LPS 50μg/kg的剂量通过腹腔注射制造急性肝衰竭小鼠模型;D-GalN/LPS+血浆组:D-GalN/LPS造模后2小时、4小时和8小时分三次通过尾静脉注射血浆,每次150μl。12小时后随机挑取每组各10只小鼠,采用颈椎脱臼处死,取肝。计算各组体重增量和肝重指数;通过HE染色观察各组小鼠肝组织病理变化;采用赖氏法检测血清中的ALT和AST水平;用ELISA试验检测肝组织匀浆TNF-α和IL-6含量;通过WB检测TLR4、BAX和Bcl-2蛋白在肝组织中的表达;利用TUNEL试验检测肝细胞凋亡;记录每组另外10只小鼠32小时内的死亡情况。  结果:  1.与血浆输注前相比,36例肝衰竭患者血浆输注后凝血功能PT、INR、APTT、TT明显降低,FIB明显增加(P均<0.05);肝功能指标TBil、ALT、AST明显降低(P均<0.001),ALB无明显变化(P>0.05);血清细胞因子IL-6明显降低(P<0.05)。  2.D-GalN/LPS模型组小鼠肝组织病理表现为肝小叶结构破坏,肝细胞大量坏死,炎性细胞浸润,出血明显。D-GalN/LPS+血浆组小鼠肝细胞坏死减少,出血减轻。  3.与D-GalN/LPS模型组小鼠相比,D-GalN/LPS+血浆组小鼠体重增量无明显差异(P>0.05),肝重指数明显降低(P<0.05),32小时死亡率明显降低(P<0.05)。  4.与 D-GalN/LPS 模型组小鼠相比,D-GalN/LPS+血浆组小鼠血清 ALT、AST明显降低(P均<0.001)。  5.与 D-GalN/LPS 模型组小鼠相比,D-GalN/LPS+血浆组小鼠肝组织匀浆 IL-6、TNF-α明显降低(P均<0.001)。  6.与D-GalN/LPS模型组小鼠相比,D-GalN/LPS+血浆组小鼠TLR4和BAX蛋白表达明显降低,Bcl-2表达明显增加,凋亡指数明显降低(P均<0.001)。  结论:  1.血浆输注能显著改善肝衰竭患者的凝血功能和肝功能指标,降低血清细胞因子IL-6。  2.血浆输注可能通过下调TLR4、BAX蛋白和上调Bcl-2蛋白在肝脏中的表达,减少细胞因子TNF-α和IL-6分泌,抑制肝细胞凋亡,从而能对D-GalN/LPS诱导的急性肝衰竭小鼠起到保护作用。
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