三酰甘油(triacylglycerol, TAG)约占人体脂类的95%,它的合成与动员是能量平衡调节的主要环节,而这一调节的失衡是诱发肥胖产生高血压、心脏病及皮下脂肪丢失等疾病的主要原因。油脂代谢会受到油脂基因所编码的脂肪调节酶的直接调控,该代谢过程在真核系统中具有高度的保守性。TAG的合成是油脂代谢中关键的步骤之一其中磷脂酸磷酸酶(phosphatidate phosphatase, PAP)在TAG合成代谢中起关键作用。PAP也称脂素,其相关基因PAH1(酿酒酵母)、LIPIN1、 LIPIN2、 LIPIN3(哺乳动物)是近年来确定的一类TAG代谢调控的关键基因。通过序列比对和分析,能够了解基因的基本信息,预测所编码蛋白的结构与功能。针对PAH1及LIPIN1的编码序列,利用NCBI、 HHpred、 Bioedit等生物信息学工具进行同源性分析；采用Phyre2蛋白质三级结构分析软件针对两个基因编码蛋白中的HAD-LIKE高度保守区域进行结构预测。同时在野生型菌株(BY4742α)的基础上成功构建PAH1缺陷型酵母；发现该突变体具有高度温度及脂毒敏感性。通过油脂成分薄层色谱分析及细胞脂滴荧光染色检测,PAH1的缺陷能够造成酵母三酰甘油合成受阻,三酰甘油含量要比野生型酵母菌株的少90%以上；细胞中脂肪滴的数量减少约70%。通过在突变体中转入人源LIPIN1基因能够部分弥补和恢复因PAH1缺失造成的油脂减少、温度和脂毒高度敏感等异常,有力地证明了PAH1与LIPIN1编码蛋白在三酰甘油合成代谢调控中的保守性。最后,针对三酰甘油代谢中起主要作用的水解酶编码基因TGL3、 TGL4进行敲除,高表达PAH1基因,人为制造TAG代谢障碍,造成胞内TAG过度积累,建立酵母肥胖模型。并以盐酸普洛萘尔,盐酸克伦特罗,盐酸黄连素,牛磺酸四种常用的降脂相关药物对肥胖酵母进行处理,发现盐酸黄连素具有较好的降脂效果。以酿酒酵母真核系统为基础,利用人类与酵母PAP高保守性,建立以PAP为核心的三酰甘油合成及相关调控机制研究平台,具有比实验动物作为脂类代谢研究及药物筛选平台耗时短、成本低、操作简便等优势。PAH1在酵母的生长及营养代谢,特别是在脂类合成代谢中起着至关重要的作用,相关的研究为进一步深入了解脂肪代谢的调控机理提供依据；而三酰甘油代谢障碍型酵母的构建及降脂相关药物活性的初步探索则为新的降脂化合物的研发奠定基础。