【摘 要】
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牛支原体是导致犊牛呼吸道症状的一种重要病原,牛支原体病的发生和流行,造成养牛场较高的犊牛死淘率与重大经济损失。为调查新疆地区集约化牛场犊牛牛支原体病流行情况,课题组于2020年5月～2021年5月采集该省7个地区14个集约化牛场犊牛的血液与鼻拭子样品,使用ELISA方法开展牛支原体病血清抗体检测;使用套式PCR方法对牛支原体特异性基因opp D/F进行扩增,开展牛支原体病病原学调查;选取部分PCR
【基金项目】
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新疆生产建设兵团重点领域科技攻关计划项目“兵团牛羊集约化养殖场幼畜高发疫病病原库建立”;兵团国际科技合作计划项目“集约化牛羊养殖合理用药与安全评价关键技术研究”;兵团区域创新引导计划“犊牛高发细菌性疫病疫苗候选菌株筛选及其灭活疫苗研究”的部分研究成果（项目编号:2019AB029、2019BC004、2018BB036）课题主持人:黄新副研究员（新疆农垦科学院）；
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牛支原体是导致犊牛呼吸道症状的一种重要病原,牛支原体病的发生和流行,造成养牛场较高的犊牛死淘率与重大经济损失。为调查新疆地区集约化牛场犊牛牛支原体病流行情况,课题组于2020年5月～2021年5月采集该省7个地区14个集约化牛场犊牛的血液与鼻拭子样品,使用ELISA方法开展牛支原体病血清抗体检测;使用套式PCR方法对牛支原体特异性基因opp D/F进行扩增,开展牛支原体病病原学调查;选取部分PCR阳性鼻拭子样品进行牛支原体分离培养,对分离株开展形态学观察、生化反应鉴定、套氏PCR检测及MLST分型检测,并通过微量肉汤二倍稀释法来检测分离株对9种抗生素的敏感性。试验结果显示:1.对新疆7个地区14个集约化牛场453份犊牛血清进行牛支原体病血清抗体检测,总阳性率为6.62%（30/453）,仅石河子地区检出抗体阳性阳性率为12.4%（30/242）;群体阳性率为35.71%（5/14）,其中场11阳性率最高为27.27%（6/22）;检出抗体阳性的5个集约化牛场均有呼吸疾病流行病学史。2.对新疆7个地区14个集约化牛场453份犊牛鼻拭子进行PCR检测,总阳性率为37.09%（168/453）,其中乌鲁木齐地区PCR阳性率最高为52.00%,克拉玛依地区阳性率最低为13.33%,各地区之间差异极显著（P＜0.01）;4月龄犊牛PCR阳性率最高为56%（14/25）,各月龄之间差异极显著（P＜0.01）;冬季采集的样品PCR阳性率为39.15%（83/212）高于春季35.27%（85/241）,季节之间PCR阳性率差异不显著（P＞0.05）。3.对阳性鼻拭子样品进行培养共获得10株分离株,菌落呈“煎蛋样”;分离株符合支原体典型的染色特征;分离株符合牛支原体生化特性;16S r RNA测序序列结果显示分离株与Gen Bank数据库中多个牛支原体菌株核苷酸相似性高达99.25%以上;MLST分型鉴定,7株鉴定为ST52型,3株未定型;分离株对6种抗生素具有耐药性,仅对替加环素和红霉素敏感。结论:新疆地区关于犊牛牛支原体抗体方面的研究有所空缺,本试验提供数据了资料。病原学调查发现,PCR阳性率高于2020年新疆地区的相关报道,呈上升趋势。10株分离株仅对替加环素与红霉素敏感,对6种常见的抗菌药物具有耐药性,提示该地区牛支原体菌株具有较强的耐药性。本研究结果为新疆地区牛支原体病的诊断与防治工作提供参考资料。
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