多组学研究水稻幼苗响应镉胁迫的分子机制

来源 :江西农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:peterqiu123
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镉对水稻的影响是一个日益受到全球关注的问题。虽然在水稻中已经鉴定出许多与水稻Cd转运、累积和耐受性相关的基因,但蛋白质磷酸化对Cd解毒和耐受的贡献(如果有的话)仍然是不确定,同时目前也还没有通过转录组、小RNA组和降解组测序整体鉴定和验证miRNA及其靶基因在水稻幼苗响应Cd胁迫中的调控作用。本研究首次采用转录组、小RNA组、降解组和磷酸蛋白组对处于不同Cd浓度(0μΜ、10μΜ和100μΜ)胁迫下的水稻幼苗进行联合组学分析鉴定水稻幼苗中miRNA/靶基因和磷酸蛋白质在响应镉胁迫中的作用。主要结果如下:(1)通过转录组分析一共鉴定到4,223个差异表达基因响应镉胁迫,其中有2,487基因受镉诱导表达,1736个基因表达被镉胁迫抑制。功能分析显示这些差异表达基因主要是参与光合作用(光收获、光系统I和II、光合作用、电子载体活性和叶绿素结合)和蛋白质降解代谢途径(萘、蒽降解、柠檬烯、蒎烯降解和γ-六氯化苯降解)。(2)通过miRNA组和降解组分析鉴定到40个miRNA在Cd胁迫下发生了显著改变,其中包括代表22个miRNA家族的38个已知miRNA和2个新的miRNA。18个差异表达的靶基因的表达量与18个Cd响应miRNA的表达量呈负相关。大多数miRNA的靶标基因是转录因子,如生长素响应因子13(ARF13),类稻草蛋白6(SCL6),类鳞状病毒启动子结合蛋白,核转录因子Y亚基A-6(NFYA6),赤霉素依赖性禽髓母细胞病毒癌基因(GAMYB)和顶端分生组织蛋白质(NACs),其中大多数是参与脱落酸(ABA)、生长素、赤霉素酸(GA)和MAPK(丝裂原激活蛋白激酶)等信号转导途径。功能分析表明,参与水稻光合作用通路(osa00196,osa00195,osa00710)和蛋白降解通路(osa04612)的miRNA和其靶标基因参与了Cd胁迫的响应,包括osa-mi R156I-5pR-1/SPLs、osa-mi R171a1ss12CT/DEGP10和osa-mi R169r-5pR/NFYA6。本研究将为研究miRNA介导的植物对Cd胁迫响应的分子机制提供一个有用的方法。(3)对不同Cd浓度(0μΜ、10μΜ和100μΜ)溶液中培养的幼苗进行定量磷蛋白组分析,共鉴定出1244个磷酸蛋白质和2454个磷蛋化修饰位点。在Cd胁迫下,共有482个蛋白的磷酸化修饰发生不同程度的改变;在100μΜCd2+处理样品中鉴定到的差异磷酸化的蛋白质数量是10μΜCd2+处理样本中的6倍。功能分析表明,大量差异磷酸化蛋白是参与信号传导、对胁迫的耐受性和活性氧的清除的转录因子。
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