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目的:探讨大蒜素对白细胞介素-6(IL-6)诱导的胃癌细胞上皮-间质转化(EMT)的抑制作用及机制的初步研究,在分析大蒜素对胃癌细胞体外作用的基础上进一步研究大蒜素对胃癌细胞发生EMT后的增殖、迁移、侵袭的作用及对E-钙粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)及核因子κB P65(NF-κB P65)的表达影响,为深入研究大蒜素调控NF-κB信号通路对EMT的发生发展作用机制奠定基础,为胃癌浸润转移的阻断治疗提供理论依据。方法:常规用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养基培养人胃癌细胞株HGC-27,应用大蒜素(3μg/L)联合IL-6(50 ng/mL)、大蒜素(3μg/L)、IL-6(50 ng/mL)培养胃癌细胞株HGC-27,另设阴性对照组,运用CCK-8(Cell Counting Kit-8)实验、细胞划痕(Wound Healing)实验、细胞侵袭实验分别检测大蒜素对胃癌HGC-27细胞的增殖、迁移和侵袭能力;实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测大蒜素干预前后胃癌HGC-27细胞E-cadherin、Vimentin及NF-κB P65的mRNA表达。结果:1.大蒜素对胃癌HGC-27细胞体外作用的研究CCK-8实验结果显示,与阴性对照组相比,大蒜素组对胃癌HGC-27细胞具有明显的抑制作用,且随着作用时间的增加,抑制作用更加明显(P<0.05)。划痕实验示:在划痕0 h,阴性对照组与大蒜素组划痕无明显差异性(p>0.05),随着加药后时间的推演,与阴性对照组相比,12、24 h胃癌细胞经大蒜素组干预后的迁移能力明显减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞侵袭实验示:相对于阴性对照组而言,大蒜素组侵袭数目减少,差异有统计学意义。RT-qPCR示:相对于阴性对照组而言,加入3μg/mL大蒜素后E-candherin的mRNA表达上调,Vimentin及NF-κB的mRNA表达下调,P<0.05,差异具有统计学意义。2.大蒜素对胃癌HGC-27细胞发生EMT后体外作用的研究2.1在倒置显微镜下发现,阴性对照组中胃癌HGC-27细胞间连接紧密,呈极性状态,符合典型的上皮细胞特性;当加入50 ng/mL IL-6处理细胞后,我们发现细胞改变原来的细胞形态,逐渐变成长梭形,细胞散在分布,呈现间质细胞特性;当在50 ng/mL IL-6基础上再加入3μg/mL大蒜素继续培养48 h,细胞之间慢慢聚拢连接,长势转好。2.2 CCK-8实验检测发现IL-6诱导后细胞具有明显的增殖优势,而联合大蒜素后可抑制这种优势。细胞划痕实验发现:与IL-6组相比,大蒜素联合IL-6组划痕愈合百分比缩小,尤其是作用24 h后,IL-6组划痕处几乎被迁移细胞遮盖,而在此基础上加用大蒜素后细胞的迁移能力明显减弱。细胞侵袭实验示:与阴性对照组相比,IL-6侵袭数目明显增多,且大蒜素联合IL-6组细胞的侵袭能力较对IL-6组明显减弱。RT-qPCR示:相对于阴性对照组来说,IL-6组E-cadherin的mRNA表达下调,Vimentin及NF-κB P65的mRNA表达上调。而且,相对于IL-6组而言,大蒜素联合IL-6组E-candherin的mRNA表达上调,而Vimentin的mRNA表达下调,同时NF-κB的mRNA表达下调,P<0.05,差异均具有统计学意义。结论:1.大蒜素能够抑制胃癌HGC-27细胞的增殖、迁移及侵袭,并能抑制其发生EMT;2.大蒜素对IL-6诱导的胃癌细胞EMT现象也有明显的抑制作用;3.大蒜素对胃癌细胞EMT的作用过程可能与NF-κB信号通路有关。