杠板归提取物对黄粉虫生物活性测定的研究

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杠板归为蓼属植物,具有抗炎、抗疱疹病毒、抗肿瘤、止咳、杀虫等活性作用。本试验通过以黄粉虫为供试试虫,以杠板归不同层提取物的麻醉活性及其影响黄粉虫体重、蜕皮等生长发育因素的活性为筛选指标,旨在为系统研究杠板归的活性成分及开发杠板归的药用价值提供活性依据。结果表明:(1)杠板归不同层提取物对不同龄的黄粉虫的麻醉效果存在剂量依赖效应,且麻醉时间控制在10 min以内麻醉效果较显著,敏感龄期为3龄幼虫;(2)石油醚萃取物的麻醉活性最显著;当浓度为4 mg/ml时,石油醚萃取物对3、8龄黄粉虫的麻醉活性最好,处理3 min时校正麻醉率均为100%,LC50分别为0.0083 mg/ml和0.0589 mg/ml,较其它萃取物的麻醉中浓度低;正丁醇萃取物的麻醉活性仅次于石油醚萃取物,处理3 min时对8龄黄粉虫的LC50为0.4524mg/ml,也较其它物质的麻醉中浓度低;(3)杠板归乙酸乙酯萃取物对3龄黄粉虫的体重影响在16天内最显著,乙酸乙酯萃取物处理的3龄黄粉虫的平均体重增长率低于对照组相较其它萃取物更显著,但各浓度之间规律不明显,没有达到显著性差异,对黄粉虫体重的具体影响需要进一步验证;(4)杠板归粗提物及其萃取物处理3、6、8龄黄粉虫,分别在第8、6、10天完成第一次蜕皮,不同浓度的杠板归石油醚萃取物对6龄黄粉虫的蜕皮影响与对照组达到了显著水平,但浓度之间规律不明显,没有达到显著性差异,因此浓度剂量对黄粉虫蜕皮的影响需要进一步验证。因此,麻醉活性成分主要分布在极性偏小的石油醚所在极性范围,也有少量分布在极性偏大的正丁醇层所在极性范围内;影响黄粉虫体重乃至抑制生长发育的活性物质存在于乙酸乙酯层中,且低龄敏感的黄粉虫体重受影响较显著,而影响黄粉虫蜕皮乃至生长发育的活性物质存在于石油醚层中,且蜕皮与黄粉虫的龄期也有关,龄期越大完成第一次蜕皮的时间应延后,即物质和龄期均是影响黄粉虫体重及蜕皮变化的重要因素。具体活性化学成分需要进一步的分离鉴定,才能将物质与活性相结合,以活性为指导开发利用植物源农药。采用HPLC-MS对杠板归石油醚,乙酸乙酯,正丁醇部位进行分离,通过ESI-MS、ESI-MS/MS以及ESI-MS/MS/MS波谱解析法、结合查阅天然化合物库网站(http://kanaya.naist.jp/knapsack_jsp/top.html)及相关参考文献,从杠板归中共分离鉴定出58个化合物,其中共有47个化合物是首次从杠板归种中分离鉴定的,它们包括脂肪酸类25种,分别是化合物4、11~34;黄酮类7种,分别是35~41;苯丙素类3种,分别是5、42、50;甾类4种,分别是6、51~53;萜类3种,分别是7、8、54;以及其他类型化合物5种,分别是10、55~58。
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