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目的:两面针为芸香科花椒属植物两面针Zanthoxylum nitidum（Roxb.）DC.的干燥根,具有活血化瘀,行气止痛,祛风通络,解毒消肿的功效。近年来,两面针被开发成多种制剂、日化产品,得到广泛应用。关于两面针的化学组成和药理作用方面的研究报道较多,而对其发挥体内作用的物质基础及体内过程的报道相对较少。本论文在前人研究的基础上,全面系统地分析两面针中生物碱成分的吸收、代谢及主要入血成分的动态变化情况,阐明两面针药效物质基础和药代动力学性质,进而为建立合理有效的两面针质量评价体系、临床安全合理用药及其资源开发利用提供基础。方法:1.两面针水提液化学成分的定性分析采用超高效液相色谱串联飞行时间质谱法（UPLC-Q-TOF-MS/MS）分析两面针水提液样品,获得样品中各化合物的保留时间、高分辨质谱数据。通过与对照品和参考文献的数据进行比对,总结不同结构生物碱质谱裂解规律,对两面针提取液样品的各个色谱峰进行结构鉴定。2.两面针中代表性单体化合物在大鼠体内代谢产物分析大鼠分别灌胃给药木兰碱30 mg/kg、α-别隐品碱20 mg/kg、茵芋碱20 mg/kg,收集血浆、尿液及粪便样品,采用UPLC-Q-TOF-MS/MS进行分析的,获得各样品中代谢产物的保留时间、高分辨质谱数据。利用MetabolitePilotTM代谢软件,结合原型化合物的质谱裂解规律,对木兰碱、α-别隐品碱、茵芋碱在大鼠体内的代谢产物进行鉴定。3.两面针水提液在大鼠体内的代谢产物分析采用UPLC-Q-TOF-MS/MS分析大鼠灌胃给药两面针水提液后的血浆、尿液及粪便样品,获得各样品中代谢产物的保留时间、高分辨质谱数据。结合两面针水提液化学成分的定性分析数据,鉴定各生物样品中两面针的原型成分。结合木兰碱、α-别隐品碱、茵芋碱单体在大鼠体内的代谢产物信息,重点比对分析两面针提取液中这3种生物碱这在大鼠体内的代谢产物。使用MetabolitePilotTM代谢软件,初步鉴定两面针提取液中的其他生物碱在体内的代谢产物。4.两面针主要入血成分木兰碱、α-别隐品碱、茵芋碱的药代动力学研究采用高效液相串联三重四极杆质谱（LC-QqQ-MS/MS）,建立能够同时测定大鼠血浆中木兰碱、α-别隐品碱、茵芋碱的LC–MS/MS法,并成功将其应用于两面针中主要入血成分的药代动力学研究。结果:1.两面针水提液的生物碱类特征成分在两面针水提液中共鉴定出47个生物碱类化合物,其中16个化合物为首次在两面针中报道。47个生物碱分别为阿朴芬类8个、普罗托品类4个、苄基异喹啉6个、四氢原小檗碱类2个、原小檗碱类4个、苯并菲啶类12个,喹啉类9个,其它生物碱类2个。实验结果显示两面针中生物碱的种类较为丰富,就质谱响应水平来看,各类生物碱在两面针中的含量差异明显,以木兰碱、N,N-二甲基莲叶桐种碱、蝙蝠葛碱、α-别隐品碱、茵芋碱、两面针碱、白屈菜红碱为主要成分。2.两面针中代表性单体化合物在大鼠体内的主要代谢产物大鼠灌胃给药木兰碱后,共鉴定出8个代谢产物,其中包括7个Ⅰ相代谢产物和1个Ⅱ相结合代谢产物。Ⅰ相代谢产物主要包括（1）甲氧基的去甲基、双去甲基,（2）氧化,（3）脱氢,（4）成酮。Ⅱ相代谢产物仅检测到甲基化结合产物。大鼠灌胃给药α-别隐品碱后,共鉴定出25个代谢产物,其中包括14个Ⅰ相代谢产物和11个Ⅱ相结合代谢产物。Ⅰ相代谢产物主要包括（1）甲氧基的去甲基,（2）亚甲二氧基开环、亚甲二氧基开环后去甲基,（3）母核上的氧化,（4）上述三种的组合。Ⅱ相代谢产物主要是Ⅰ相代谢产物的葡萄糖醛酸化、硫酸化结合产物及少量葡萄糖结合产物。大鼠灌胃给药茵芋碱后,共鉴定出16个代谢产物,其中包括10个Ⅰ相代谢产物和6个Ⅱ相结合代谢产物。Ⅰ相代谢产物主要包括（1）甲氧基的去甲基化、双去甲基,（2）氧化,（3）氧化后水解,Ⅱ相代谢产物主要是去甲基及氧化后的葡萄糖醛酸化或硫酸化产物。3.两面针水提液在大鼠体内的代谢产物研究大鼠灌胃给药两面针水提液后,血浆中,尿液中,粪便中分别检出42、63、61个化学成分,合计为84个原型成分及其代谢产物,其中包括46个原型成分,38个代谢产物。在血浆中仅发现19个两面针原型成分,在尿液中检测到27个,粪便中检测到42个。其中17个原型成分仅在粪便中检测到,推测原因可能与这些成分在两面针中含量相对较低或吸收相对较差有关。与单体化合物代谢产物相比,水提液给药后代谢途径较为一致,同时各单体部分代谢产物也是两面针水提液中原型成分。4.两面针中主要入血成分木兰碱、α-别隐品碱、茵芋碱的药代动力学研究采用高效液相色谱串联三重四极杆质谱,首次建立了能够同时测定大鼠血浆中木兰碱、α-别隐品碱、茵芋碱的LC–MS/MS法。该方法的方法学考察符合相关要求,选择性好,灵敏度高,可用于大鼠灌胃给药两面针水提液后血浆中木兰碱、α-别隐品碱、茵芋碱的药动学研究。两面针提取液大鼠灌胃给药后,木兰碱、α-别隐品碱、茵芋碱均在大鼠体内迅速吸收。木兰碱、α-别隐品碱、茵芋碱的达峰浓度Cmax为112.69±18.79、100.28±49.91和8.91±1.89 ng/ml,Tmax分别为和1.05±0.71、0.47±0.13和0.38±0.12 h。结论:本研究首次对两面针及其3种主要生物碱类成分进行了体内外全面、系统的分析,明确了两面针水提液被大鼠吸收进入体内的主要原型成分及在体内的主要代谢产物,对于阐明两面针的药效物质基础、完善质量标准体系以及创新药物的研发具有重要意义。两面针中木兰碱、α-别隐品碱、茵芋碱等三种成分能被大鼠迅速吸收、代谢,结合它们的体内外药理活性,推测它们为两面针发挥作用的药效物质,值得深入探讨,并应确立为质量评价指标性成分;而普遍关注的两面针碱由于口服吸收差,其在体内如何发挥药效,需要进一步明确。