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目的:探讨以补肾化瘀立法的“补肾活血方”对排卵障碍性不孕症促排卵的作用机制,阐明其治疗排卵障碍性疾病的作用机理、作用环节和作用部位,为本方治疗排卵障碍性疾病提供试验与理论依据。
方法:本实验采用动物实验的方法,选用9日龄SD雌、雄性幼鼠130只,体重约15g。随机分出110只雌、雄性幼鼠(实验组)予以注射丙酸睾丸酮制作无排卵性不孕大鼠模型,剔除42只雄性大鼠后,将68只雌性大鼠中成模的58只大鼠随机分为模型对照组、克罗米芬组、中药治疗高剂量组、中药治疗中剂量组、中药治疗低剂量组;余下20只雌、雄性幼鼠(正常组)予以注射等量中性茶油,剔除9只雄性大鼠后,将11只雌性大鼠设为空白对照组。实验采用放免测定、免疫组织化学检测等方法,对补肾活血方治疗前后的无排卵性大鼠的卵巢、子宫的外观变化及内分泌功能及其卵巢组织局部转化生长因子β1(TGF-β1)的表达进行同步观察。
结果:中药补肾活血方剂能明显增加大鼠卵巢、子宫重量指数,提高大鼠血清促卵泡刺激素(FSH)和促黄体生成素(LH)的水平,以改善大鼠内分泌机能,与模型组的比较,差异具有非常显著性意义(P<0.01),方药用量达高剂量时,疗效值与克罗米芬组的比较,差异具有显著性意义(P<0.05),并向空白组的疗效值靠拢,有利于促进卵泡的发育和排卵;卵巢局部转化生长因子β1(TGF-β1)的免疫组化结果显示,模型组大鼠卵巢的颗粒细胞、间质细胞及卵母细胞中检测的TGF-β1主要呈强阳性表达,少数呈阳性及弱阳性表达,其表达强度与空白组、克罗米芬组及中药高剂量组比较,差异具有非常显著性意义(P<0.01),方药用量达高剂量时表达强度类似于克罗米芬的表达强度,并向空白组的表达强度靠拢。
结论:上述实验结果表明,通过对9日龄SD雌性幼鼠注射丙酸睾丸酮可以建立无排卵性不孕大鼠模型。以补肾化瘀立法的“补肾活血方”通过改善大鼠的卵巢、子宫质量指数,影响大鼠的FSH、LH的水平,改善其内分泌机能;通过调整其卵巢组织局部转化生长因子β1(TGF-β1)的表达,促进卵泡的生长、发育,从而达到促排卵的目的。说明中医补肾活血方药对排卵障碍性不孕的治疗确有分子水平的理论依据。