急性脑出血患者血清HIF-1α与VEGF、Hsp70之间的相关性研究

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目的:观察急性脑出血患者血清低氧诱导因子-1α(Hypoxia induciblefactor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growthfactor,VEGF)及热休克蛋白70(Heat shock protein70,Hsp70)的动态表达。研究这三个因子与出血量、神经功能缺损程度的关系,以及这三个因子之间的相互关系。探讨三者在脑出血后的脑组织保护作用。方法:1、对四川省人民医院神经内科2012年10至2013年11月间收治的30例急性脑出血患者分别于发病后12h、ld、2d、3d、5d、7d、10d采肘前静脉血3ml,对照组亦采静脉血一次。血标本静止后取上层血清置于﹣80℃冰箱备用,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定标本血清HIF-1α、VEGF及Hsp70的表达。2、病例组均为符合全国第四届脑血管病学术会议制定的诊断标准[1],发病时间在12h内经头颅CT证实为基底节出血,根据多田氏公式(V=a×b×c×π/6.V:出血量,a:最大血肿面积层面血肿的最长径,b:最大血肿面积层面上与最长径垂直的直径,c:CT片中出现出血的层面数)计算出血量分为:A组(脑出血量<20mL14例)、B组(脑出血量20~30ml9例)、C组(脑出血量>30ml7例)。3、根据美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)分别对脑出血组患者发病12h、3d、7d、10d进行神经功能缺损评分。4、使用SPSS17.0软件进行数据统计分析,采用t检验对脑出血组和对照组基本资料进行比较,采用单因素方差分析不同时间点血清HIF-1α,VEGF及Hsp70表达及与不同出血量比较;应用双变量相关分析血清HIF-1α、VEGF和Hsp70与出血量及NIHSS评分之间的相关性及三个因子之间的相关性。结果:1、HIF-1α的表达:脑出血组不同时间点(12h、ld、2d、3d、5d、7d、10d)的血清HIF-1α浓度在与对照组比较差异有统计学意义((p<0.05);血清HIF-1α在脑出血后12h内开始表达,在发病后3d达到高峰并基本持续到第7d,后浓度逐渐下降。2、不同出血量的血清HIF-1α表达比较:A组、B组和C组在12h、ld、2d、3d、5d、7d、10d血清HIF-1α进行两两比较有显著差异(p<0.01)。3、VEGF的表达:脑出血发病后12h、1d、2d、3d、5d、7d、10d血清VEGF浓度与对照组比较有差异有统计学意义(p<0.05);脑出血组发病12h内血清VEGF开始表达,于7d时达高峰,随后下降,10d仍高于对照组。4、不同出血量的血清VEGF浓度水平比较:A组与B组的血清VEGF浓度在0.5d、7d、10d比较有统计学意义(p<0.05);A组与C组在7个时间点比较有统计学意义(p<0.05);B组与C组在点发病第12h、1d、3d、5d、7d比较有统计学意义(p<0.05)。5、Hsp70的表达:发病12h、1d、2d、3d、5d、7d、10d血清HSP70浓度与对照组比较差异有统计学意义(p<0.05),发病12h内血清HSP70开始表达,3d达到高峰后,HSP70浓度逐渐下降。6、不同出血量的血清Hsp70表达水平比较:A组、B组和C组在不同时间点(12h、ld、2d、3d、5d、7d、10d)血清HSP70浓度进行两两比较有显著差异(p<0.01)。7、血清HIF-1α、VEGF和Hsp70的表达之间的相关性:1)对血清HIF-1α与VEGF的表达进行相关性分析,相关系数r=0.668,p<0.01,两者具有正相关性。2)对血清HIF-1α与Hsp70的表达进行相关性分析,相关系数r=0.857,p<0.01,两者具有正相关性。3)对血清HIF-1α与Hsp70的表达进行相关性分析,相关系数r=0.596,p<0.01,两者具有正相关性。8、血清HIF-1α、VEGF和Hsp70表达与神经功能缺损评分关系:1)对脑出血组12h、3d、7d、10d的NIHSS评分与相应时间点血清HIF-1α进行相关分析,相关系数r=0.562>0,p<0.05,两者具有正相关性。2)对脑出血组12h、3d、7d、10d的NIHSS评分与相应时间点血清VEGF进行相关性分析,相关系数r=0.305>0,p<0.01,两者具有正相关性。3)对脑出血组12h、3d、7d、10d的NIHSS评分与相应时间点血清HSP70浓度进行相关性分析,相关系数r=0.545>0,p<0.01,两者具有正相关性。结论:1、脑出血组患者血清HIF-1α表达在不同时间点均高于对照组且呈动态变化,HIF-1α浓度于发病后12h开始增加,3d达高峰,后逐渐下降。表明HIF-1α参加脑出血的发生和发展,与脑出血后的脑保护作用有关。2、脑出血组血清VEGF表达均较对照组高,且呈动态变化。VEGF浓度于发病后12h开始升高,7d达高峰,随后下降。表明VEGF参与脑出血后新生血管的生成、脑水肿的发生等。3、脑出血组血清Hsp70表达呈动态变化,Hsp70浓度于发病后12h升高,3d达高峰,随后下降。表明Hsp70参与了急性脑出血的发生与发展,与脑出血后对抗脑组织损相关。4、HIF-1α浓度与出血量、神经功能缺损评分有关,这表明血清HIF-1α表达水平与病情严重程度有一定关系。血清VEGF的表达水平与出血量、NIHSS评分有关,且呈正相关。这提示VEGF的表达与病情严重程度有一定关系。Hsp70表达与不同出血量和不同NIHSS评分呈正相关,提示Hsp70与病情的严重程度有关。5、HIF-1α、VEGF及Hsp70在脑出血后的表达具有时间先后序列的关系,三者在脑出血后的急性期具有保护作用。
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