小鼠肺肿瘤细胞的力学特性研究

来源 :沈阳大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bkguo2008
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肿瘤是一种严重的恶性疾病,每年因肿瘤失去生命的人数仅次于死于心脑血管疾病的人数,它已经成为危害人类生命的第二大杀手,而肺肿瘤的高发病率和高死亡率也引起了众多科学家的关注,近10年来,在我国的许多地区,肺肿瘤的发病率和死亡率都一直处于恶性肿瘤之首,所以目前关于肿瘤的研究非常广泛,但是在细胞的力学特性与肿瘤的发生关系方面的研究报道还比较少,我们通过观察研究肺肿瘤细胞和正常肺细胞之间的变化,探索细胞牵引力在细胞病变过程中的变化机制。细胞牵引力(CTF)是一个非常重要的细胞物理参数,与炎症反应,伤口愈合,血管生成,信号转导等有着紧密的关系,本文基于国内外肺肿瘤细胞的力学研究方法和基础之上,研究了肺细胞癌变前后的力学特征变化。目的:经过对细胞牵引力的对比,探究小鼠肺细胞癌变前后两者之间的变化规律,探索细胞癌变对细胞力学特性和状态的影响。方法与结论:1.细胞培养。获取目标细胞,放置在CO2培养箱培养,培养三四天后,要更换培养基,及时除去没贴壁的细胞。用倒置显微镜观测细胞发展形态,选取长势情况较好的细胞扩大培养,每隔三天进行下一次的传代,等到大部分细胞长势状态良好时,留作实验备用。2.鬼笔环肽染色。取出长势良好的细胞,利用罗丹明-鬼笔环肽进行染色试验,分别对试验所选的肺肿瘤细胞和肺细胞染色,结果发现细胞微丝骨架变化明显,癌变后细胞微丝呈扭曲状而非有序排列,呈现出包含能量的状态。3.α-SMA蛋白的检测。通过荧光抗体染色技术,分别对试验材料所选的两类细胞进行单个染色分析,结果发现小鼠肺细胞癌变后α-SMA蛋白的表达下降,分布变得分散。4.细胞牵引力的测定。利用CTFM (Cell Traction Force Microscopy)法,即显微镜追踪法,分别检测小鼠肺细胞癌变前后细胞牵引力,相对于癌变前的细胞,其牵引力减少了49%,平均值更是由552pa减少到281pa。经测算细胞投影表面积平均值由950um2减少到691um2,大约减少27%左右。细胞在基质上产生的最大位移由2.5um减少为2.2um。本文的研究结果揭示了小鼠肺细胞癌变前后的形态、内部构象、蛋白表达以及牵引力的变化,为进一步深入研究肺细胞在癌变过程中的力学变化机制提供了初步依据,具有一定的重要的意义。
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