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目的:1.评价导流杂交基因芯片技术(hybriMax)在宫颈人乳头状瘤病毒(HPV)感染检测及宫颈病变诊断中的应用价值;2.了解不同级别宫颈病变患者常见HPV感染基因型(又称亚型);3.评价最常见HPV亚型发生宫颈病变的风险;4.判断多重感染与宫颈病变程度的关系。
方法:1.在中日友好医院妇产科行宫颈癌筛查女性4200例中,选取细胞学异常者253例及细胞学正常以往无宫颈病变史者57例,采用导流杂交基因芯片技术进行宫颈细胞HPV6、11、42、43、44、16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、CP8304(81)等21种亚型的分型检测,同时用杂交捕获二代(HC-Ⅱ)进行13种(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68)高危型HPV的检测,对两者结果不符合的标本进行基因测序;对上述患者中的101例宫颈组织标本进行HPV16/18原位杂交;比较不同方法检测结果的一致性。2.在原基础上扩大样本,自7520例宫颈癌筛查女性中选取异常者共453例,正常者共138例,按组织病理结果分为慢性炎症组、宫颈湿疣组、宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组、宫颈癌组。对上述研究对象用HybriMax法进行21种HPV亚型的分型检测,计算各基因型在不同病变类型中的阳性率,常见基因型发生CIN的危险度比值比(OR)及多重感染在不同病变类型中的比例。
结果:1.HybriMax与HC-Ⅱ两种方法对13种高危型HPV感染的检出结果一致性良好,总符合率92.3%,宫颈癌组符合率100%;Kappa指数(KI)总体为0.796,正常组0.766,炎症组0.768,宫颈湿疣组0.791,CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ组分别为0.654,0.478,1.0,一致性好。结果不一致标本测序结果60%支持HybriMax,28%支持HC-Ⅱ。2.HybriMax对宫颈病变诊断的灵敏度与HC-Ⅱ无差异。3.HybriMax与HPV16/18亚型原位杂交检测结果符合率为89.1%,KI=0.776。4.用导流杂交法检测的宫颈病变患者HPV阳性率随病变级别增加而增加,最常见的基因型为16、18、52、58、33、31。5.HPV16阳性率随病变级别的增加迅速上升,HPV18在CINⅢ及宫颈癌组中的阳性率明显高于炎症组、CINI、Ⅱ组。HPV52、58在CIN各组中的阳性率均高于正常组和炎症组,甚至宫颈癌组。最常见6种基因型发生CIN的OR值均大于1。6.宫颈病变患者多重感染的比例随病变级别增加而增加,分别为正常组19%,炎症组35.8%,CINⅠ组45.9%、CINⅡ组54.9%、CINⅢ组59.5%。
结论:1.导流杂交基因芯片技术与HC-Ⅱ及原位杂交检测结果一致性良好,对宫颈病变的检出率与HC-Ⅱ一致,所得分型结果与世界范围的报道一致,对多重感染的检出率高,因而是HPV分型检测的理想方法。2.HPV16、18、52、58、33、31为宫颈病变患者最常见的6种感染亚型,前5种与宫颈癌患者一致。3.HPV16致病力强,HPV18阳性患者可能较少经历CINⅠ、Ⅱ或进展较快,HPV52、58患者更易发生CIN而非宫颈癌。4.多重感染与宫颈病变发生有关。