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第一部分 BAG3参与细胞内自噬过程及 a-synuclein降解 目的：研究B A G3是否参与了*SWG4wt-PC12细胞内的自噬过程及a-synuclein的降解。 方法：以多巴胺能细胞株-高分化P C12细胞为工具细胞，以携带SVCMW T的慢病毒感染高分化PC12细胞诱导a-synuclein过表达，用免疫荧光及Western blot检测慢病毒感染效率；蛋白酶体抑制剂MG132抑制*SWCMwt-PC12细胞的蛋白酶体途径后，用MTT法检测细胞活力;Western blot方法检测a-synuclein、p62、自卩遼相关蛋白LC3 II及BAG3等蛋白的表达；PCR检测及转录水平变化；瞬时转染技术干扰B a g3和过表达B A G3观察其对*SWC4wt-PC12细胞自噬相关蛋白LC3 II的影响及其在a-synuclein降解中的作用。 结果：MG132可呈浓度依赖性降低*WCMwt-PC12细胞活力，弓|起*SWCMwt-PC12细胞内a-synuclein蛋白蓄积，但对a-synuclein的 m R N A水平无明显影响。MG132呈浓度及时间依赖性上调SVC4wt-PC12细胞内自噬相关蛋白LC3 I I、p62及 BAG3的蛋白水平；并呈浓度依赖性增加*WG4wt-PC12细胞p62及Bag3 m R N A水平。敲减汝设3可减少*SWG4wt-PC12细胞及M G132处理后*WCMwt-PC12细胞内LC3 I I的蛋白表达，并加剧细胞内a-synuclein的蓄积；过表达B A G3可增加*WCMwt-PC12细胞及 MG132处理后*SWC4wt-PC12细胞内LC3II的的蛋白表达，并减少细胞内a-synuclein的蓄积。 结论：蛋白酶体抑制剂M G132可导致*WCMwt-PC12细胞内a-synuclein降解障碍。B A G3可诱导自噬并减少a-synuclein蓄积，参与了*WCMwt-PC12细胞内自噬过程及a-synuclein的蛋白降解过程。 第二部分BAG3通过分子伴侣为基础的选择性自噬促进a-synuclein的降解 目的：研究B A G3对SVC4WT-PC12细胞内a-synuclein自噬性降解调控的分子机制，观察其是否通过促进分子伴侣Hsp70为基础的选择性自曬参与a-synuclein的降解。 方法：通过瞬时转染技术干扰乂怒5抑制自噬体形成，观察BAG3是否还能诱导自曬进一步降解a-synuclein蛋白。Western blot方法检测Hsp70蛋白的表达；PCR检测70转录水平的变化；采用免疫共沉淀（Co-IP)方法分别检测MG132及过表达BAG3后*SWC4wt-PC12细胞内BAG3与p62、Hsp70蛋白的结合情况。 结果：敲减 Afg5基因后，过表达B A G3也不能促进*WCMwt-PC12细胞内a-synuclein蛋白的降解。M G132可呈浓度及时间依赖性增加*SWCMwt-PC12细胞内Hsp70的蛋白水平，同时可呈浓度依赖性增加Hsp70的 mRNA水平。*SWG4wt-PC12细胞内p62、Hsp70可分别与BAG3结合，在 MG132处理后或BAG3过表达的情况下，p62、Hsp70与B A G3的结合量均进一步增加。 结论:BAG3蛋白可通过形成BAG3-Hsp70复合体与自噬底物蛋白p62相互作用，B A G3介导的这一选择性自噬促进了*SWG4wt-PC12细胞内a-synuclein的降解。