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卵巢癌发病率位居女性生殖系统恶性肿瘤第三位,死亡率居首位。因缺乏特异性症状和有效的早期诊断手段,70%患者就诊时已是晚期。手术和放、化疗这些传统的治疗手段不能显著改善晚期患者长期生存率,探究新的有效的综合治疗方法成为必要。光动力疗法（photodynamic therapy,PDT）是一种新兴的肿瘤治疗方法,在多种恶性肿瘤的临床实验研究中取得了满意效果。90%的恶性肿瘤细胞中高表达端粒酶,针对端粒酶催化亚单位的反义治疗能有效抑制端粒酶活性。本研究旨在体外细胞实验研究5-氨基乙酰丙酸（5-aminolevulinic acid,5-ALA）介导的光动力疗法（5-ALA-PDT）、针对端粒酶催化亚单位的反义治疗及两者联合应用对卵巢癌细胞的杀伤作用。第一章5-氨基乙酰丙酸光动力疗法对人卵巢癌细胞的杀伤作用目的:探讨5-氨基乙酰丙酸（5-aminolevulinic acid,5-ALA）介导的光动力疗法（photodynamic therapy,PDT）对体外培养的人卵巢癌3AO细胞的杀伤效应。方法:显微镜观察细胞形态;MTT法检测5-ALA-PDT对3AO细胞增殖的抑制作用;采用PI染色及Annexin V-PI双染结合流式细胞术分析5-ALA-PDT对3AO细胞周期及死亡方式的影响;利用RT-PCR技术检测凋亡相关基因caspase-3mRNA水平的变化来研究5-ALA-PDT诱导细胞凋亡的相关机理。结果:5-ALA-PDT后出现典型凋亡形态学改变;细胞抑制率随着5-ALA浓度及激光能量密度的升高而升高（P＜0.01）,当光敏剂浓度达到一定水平时,抑制率不再相应升高,该作用存在浓度饱和现象;流式细胞术显示PDT后发生了G0/G1期生长停顿（P＜0.05）,有明显的晚期凋亡和继发性坏死（P＜0.01）;caspase-3mRNA水平随着光动力作用的增强而升高（P＜0.05）。结论:5-ALA对卵巢癌3AO细胞有杀伤作用;凋亡是5-ALA-PDT杀伤卵巢癌细胞的一种机制。第二章人端粒酶催化亚基反义寡核苷酸对卵巢癌细胞的杀伤作用目的:探讨人端粒酶催化亚单位（hTERT）反义寡核苷酸（ASODN）对卵巢癌细胞系3AO细胞生长的影响方法:合成针对人端粒酶催化亚单位的反义及正义寡核苷酸,行全硫代磷酸化修饰,采用LIPOFACTAMINE 2000转染卵巢癌细胞系3AO。RT-PCR技术检测转染前后hTERT mRNA水平的变化,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测转染后细胞死亡方式的改变。结果:转染ASODN后细胞hTERT mRNA水平较对照组及明显降低（P＜0.05）;细胞抑制率随着ASODN片段浓度的增加而升高（P＜0.05）,作用存在浓度饱和作用,且具有明显的时效性,以浓度为2.0uM的ASODN作用72h时作用最显著;转染后细胞凋亡比例增加（P＜0.05）。结论:人端粒酶催化亚单位反义寡核苷酸可以抑制卵巢癌细胞增殖,细胞凋亡是其可能机制。第三章5-ALA-PDT与hTERT ASODN转染联合应用对卵巢癌细胞的杀伤作用目的:探讨5-ALA-PDT与hTERT ASODN转染联合应用后对卵巢癌细胞生长的影响方法:将5-ALA-PDT与hTERT ASODN转染两种方法分别及联合应用作用于人卵巢癌细胞3AO后,MTT法检测对细胞生长的抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:5-ALA-PDT、hTERT ASODN转染作用于细胞后,都可抑制细胞生长,两种方法联合应用后,对卵巢癌细胞增殖的抑制更明显,明显优于单用其中任何一种方法（P＜0.05）,抑制作用具有时间依赖性,48h抑制作用最强。与单独应用任一方法相比,联合组细胞凋亡比例显著增高（P＜0.01）。结论:5-ALA-PDT与hTERT ASODN转染两种方法联合应用能够对卵巢癌细胞的增殖抑制产生协同作用,明显诱导细胞凋亡。