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目的：建立高血糖“代谢记忆”的动物及细胞模型,观察“代谢记忆”状态下大鼠代谢指标、NF-κB(核转录因子-κB)p65亚单位及前炎症因子的表达变化。方法：1. Wistar大鼠分为3组：(1)正常对照组,注射柠檬酸钠缓冲液：(2)代谢记忆组,注射链脲佐菌素(STZ)成模后维持高血糖水平12周,从第13周开始皮下注射胰岛素控制血糖水平在正常范围；(3)持续高糖组,注射STZ成模后维持24周高血糖状态。2.人主动脉内皮细胞(HAECs)分为4组：(1)正糖组,含5.5mM葡萄糖的培养基培养7天；(2)渗透压对照组,含30mM甘露醇的培养基培养7天；(3)代谢记忆组,含30mM葡萄糖的培养基培养1天后,改为含5.5mM葡萄糖的培养基培养6天；(4)高糖组,含30mM葡萄糖的培养基培养7天。3.采用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测各组大鼠主动脉组织及细胞样本中p65、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)和白介素-6(IL-6)的mRNA表达水平：采用免疫印迹(Western blot)法检测p65蛋白表达水平。结果：1.正常对照组大鼠体重持续增加,代谢记忆组及持续高糖组大鼠在注射STZ后体重增加速度均低于正常对照组；代谢记忆组大鼠体重增速高于持续高糖组,低于正常对照组。2.代谢记忆组大鼠主动脉组织及细胞样本中p65、MCP-1及IL-6的表达水平上升。结论：1.成功建立高血糖“代谢记忆”的动物及细胞模型。2.高血糖“代谢记忆”中p65及前炎症因子MCP-1、IL-6升高,NF-κB通路持续激活。目的：分别观察miR-146a和miR-484在高血糖“代谢记忆”状态下的表达变化,通过生物信息学方法寻找并确定其靶基因,观察靶基因在高血糖“代谢记忆”状态下的表达变化。方法：1.采用茎环荧光实时定量PCR法检测各组大鼠主动脉组织及细胞样本中miR-146a和miR-484表达水平变化。2.使用生物信息学方法寻找niR-146a和miR-484可能的靶基因；检测各组动物及细胞样本中靶基因的表达。结果：1.代谢记忆组大鼠主动脉组织及细胞样本中miR-146a的表达水平下降。2.靶基因预测软件预测到miR-146a的靶基因包括白介素-1受体相关激酶1(IRAK1)和肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6);代谢记忆组动物及细胞样本中IRAK1、TRAF6的蛋白表达水平上升。3.代谢记忆组动物主动脉组织及细胞样本中miR-484的表达水平下降。4.靶基因预测软件预测到miR-484的靶基因是血管内皮生长因子B(VEGFB);代谢记忆组动物主动脉组织及细胞样本中VEGFB的表达水平上升。结论：1.高血糖“代谢记忆”时miR-146a表达下降,其靶基因IRAK1和TRAF6表达增加。2.高血糖“代谢记忆”时miR-484表达下降,其靶基因VEGFB表达增加。目的：在前述研究建立的高血糖“代谢记忆”动物及细胞模型的基础上,通过细胞转染探究miR-146a和miR-484对NF-κB p65亚单位及前炎症因子的作用机制。方法：1.通过转染miR-146a mimics/inhibitors,上调或下调HAECs中miR-146a的表达,检测预测靶基因蛋白表达水平、NF-κB p65亚单位、MCP-1及IL-6的表达水平。2.通过转染miR-484mimics/inhibitors,上调或下调HAECs中miR-484的表达水平,检测VEGFB、NF-κB p65亚单位、MCP-1及IL-6的表达水平。3.通过转染VEGFB过表达质粒或VEGFB siRNA,上调或下调HAECs中VEGFB的表达,检测NF-κB P65亚单位、MCP-1及IL-6的表达水平。结果：1.转染miR-146a mimics后,HAECs中p65、MCP-1及IL-6的表达水平下降；转染了miR-146a inhibitors,细胞内p65、MCP-1及IL-6的表达水平上升。2.上调miR-146a表达可使IRAK1、TRAF6的表达水平下降;下调miR-146a表达后,IRAK1、TRAF6的表达水平上升。3.转染miR-484mimics后,HAECs中miR-484表达上升,p65、MCP-1及IL-6的表达水平下降；转染miR-484inhibitors, miR-484表达下降,NF-κB p65亚单位、MCP-1及IL-6的表达水平上升。4.转染miR-484mimics, HAECs中VEGFB的表达水平下降；转染miR-484inhibitors, VEGFB的表达水平上升。5.上调HAECs中VEGFB表达,NF-κB p65亚单位、MCP-1及IL-6的表达水平上升；下调VEGFB表达后细胞内p65、MCP-1及IL-6的表达水平下降。结论：1.高血糖“代谢记忆”时miR-146a表达下降,并可通过其靶基因IRAK1和TRAF6来调节NF-κB p65及前炎症因子的表达。2.高血糖“代谢记忆”时miR-484表达持续下降,并可通过其靶基因VEGFB调节p65及前炎症因子的表达。