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化肥的长期大量使用导致土壤板结、养分失调、产品品质降低以及环境污染等问题,而微生物肥料可以改善化肥带来的一系列负面影响,筛选出适宜菌种是研发微生物专用肥料的基础。油茶(Camelliaoleifera)是我国重要的木本油料树种,是典型的铵偏好植物。开发油茶专用微生物肥料是提高产量、品质和改善林地环境的重要措施。本研究首先进行油茶根际土壤氨化细菌分离纯化,然后筛选出具有高效转化能力的菌株,并对高效菌株的形态、生理生化特性、最优培养条件以及微生物菌剂的效应进行研究,以期为研发油茶专用微生物肥料、提高油茶氮利用效率提供参考依据。研究结果如下:1.通过传统的培养基分离纯化方法,筛选获得160株氨化细菌,然后通过纳氏试剂显色法进行初筛,得到显色较深的25株氨化细菌。氨化细菌的活性测定表明,编号为AHB、AHO、AHT、AHX的细菌活性较强。16 S rDNA测序表明,AHB、AHO、AHT、AHX的序列长度分别为 1385bp、1413 bp、1390bp和1418bp,分别属于Chryseobacteriumsp.(金黄杆菌属)、Stenotrophomonassp.(寡养单胞菌属)、Arthrobacter sp.(节杆菌属)和Bacillus sp.(芽孢杆菌属)。2.从pH、温度、转速、接种量、碳源、氮源等6个方面分别探讨了培养条件对4株高效氨化细菌生长的影响,结果表明:4个菌株在pH为5-9时均能生长,最适pH为7-8,说明4株氨化细菌适宜在中性条件下生长;4个菌株的最佳转速均为200-250r/min,最佳温度在25℃左右,但菌株AHX相对于其他菌株更耐高温;4个菌株的最适接种量为2%-3%,AHB的最适碳氮源为葡萄糖和尿素,AHO的最适碳、氮源为甘露醇和硝酸钾,AHT对于蔗糖和硝酸钾的利用程度显著高于其他碳、氮源;AHX对5种碳源的利用程度都较高,最适氮源为硝酸钾。3.对菌株AHB、AHO、AHT、AHX进行形态学、生理生化试验,结果表明:4株氨化细菌均为革兰氏阳性菌,均具有运动性,其接触酶、乙酰甲基甲醇(V-P)、明胶液化试验均表现为阳性,具有产氨能力,不具有淀粉水解、硝酸还原能力,吲哚试验表现为阴性。牛奶石蕊试验表现说明4株氨化细菌均具有产酸能力。拮抗试验表明,4株细菌互不拮抗,可以共同培养。4.通过盆栽试验研究了不同菌剂对油茶幼苗根际土壤理化性质的影响,结果表明:菌剂接种处理显著降低了根际土壤pH和全氮含量(p<0.05),AHT处理的pH下降幅度最大,为10.69%;在0-60 d菌剂接种处理能够显著提高土壤的氨氮、硝氮、速效磷、速效钾和碱解氮含量,且显著高于CK(p<0.05),从而提高土壤的肥力。在酶活性方面,菌剂接种处理的酶活性显著高于CK(p<0.05),且脲酶、过氧化氢酶、硝酸还原酶和蛋白酶活性均在接种60d后达到最大值。