基因导入系统是基因治疗的核心技术,基因治疗面临的首要问题是载体的选择,安全无毒、生物相容性好的非病毒载体已成为基因治疗研究的热点。本文利用来源于超嗜热古菌Pyrococcus horikoshii重组古菌组蛋白(HPhA),构建了HPhA/pCMV-p53(wt)基因导入系统,探讨HPhA携带野生型p53基因对恶性肿瘤基因治疗的可行性。我们考察外源基因的转录水平和蛋白质表达水平及基因表达产物对癌细胞周期及细胞凋亡的影响;并建立裸鼠肿瘤模型,进行荷瘤裸鼠的体内肿瘤生长情况及肿瘤细胞的凋亡的考察,探索其在体内基因治疗方面的应用价值;同时研究不同给药途径及剂量的HPhA在小鼠中血药浓度随时间变化的趋势,并采用房室模型法,利用Topfit软件计算分析相应的药动学参数。最后考察重组古菌组蛋白的安全性。结果表明,HPhA能携带外源基因pCMV-p53高效转染肿瘤细胞,外源基因表达产物可有效启动细胞凋亡信号转导通路,抑制肿瘤细胞生长,促使肿瘤细胞调亡;在小鼠体内,HPhA肌肉注射给药和静脉注射给药在小鼠体内的药代动力学行为符合开放性二室模型;静脉注射给药由中央向周边室分布速度较快,消除为剂量依赖性非线性动力学过程;同时进行重组古菌组蛋白在鼠模型中体液免疫和细胞免疫应答的研究,具有较低的免疫原性,是理想的新型基因药物载体。