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目的应用显微共聚焦拉曼光谱技术研究不同分子亚型乳腺癌细胞株的拉曼光谱特征,并探究拉曼光谱技术用于鉴别乳腺癌分子分型的应用价值。方法分别培养三种不同分子亚型的人乳腺癌细胞株:Luminal A型细胞株MCF-7(ER+/PR+/HER-2-),HER-2过表达型细胞株SKBR3(ER-/PR-/HER-2+)和三阴性型细胞株MDA-MB-231(ER-/PR-/HER-2-)。每种乳腺癌分子分型细胞株分别选取31个生长状态良好的细胞进行显微共聚焦拉曼光谱检测。将测得的光谱进行主成分分析(Principle Components Analysis,PCA)和线性判别分析(Linear Discriminant Analysis,LDA),获得三株细胞株拉曼光谱的典型判别函数散点图。在PCA-LDA分析的基础上,再进行交叉验证分析,进一步获得拉曼光谱判别不同分子亚型乳腺癌细胞株的灵敏度和特异度。最后,使用ROC曲线进一步衡量该方法在区分三种分子亚型细胞株的可行性。结果三种不同分子亚型的乳腺癌细胞株的平均拉曼光谱形状大致相同,各个谱峰所在位置和谱峰特征也大致相似,但在一些主要的谱峰的谱峰强度存在一定程度的差别,主要存在于533 cm-1,723 cm-1,850 cm-1,935 cm-1,1100 cm-1,1324 cm-1,1448 cm-1,1576 cm-1,1607 cm-1九个谱峰。经PCA-LDA分析和交叉验证方法得出拉曼光谱鉴别Luminal A型细胞株、HER-2过表达型细胞株和三阴性型细胞株的敏感度分别为:100%、96%、100%,特异度分别为100%、98%、100%,且该方法区分三种分子亚型细胞株的正确率达到97.8%。三种细胞株对应的ROC曲线图,产生的AUC值均是1。结论不同分子亚型的乳腺癌细胞株的平均拉曼光谱形状及谱峰位置大致相似,但在9个谱峰的谱峰强度存在差异。显微共聚焦拉曼光谱技术可以用于区分不同分子亚型的乳腺癌细胞株,并具有较高的敏感性和特异性。