有氧运动对大鼠脑衰老的学习记忆能力及海马GAP-43表达的影响

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目的:应用有氧运动(60min/d游泳训练)干预大鼠D-半乳糖致衰老模型,测定有氧运动对SD大鼠脑衰老及学习记忆能力影响的相关指标和数据及海马GAP-43基因mRNA和蛋白的表达和定位。探讨有氧运动对大鼠脑衰老及学习记忆能力以及海马GAP-43基因mRNA和蛋白表达的影响。方法:将84只SD大鼠随机分为3大组:衰老组(D组)、生理盐水对照组(Na组)、衰老过程中进行有氧运动干预组(Ds组)。D组自然喂养4周后,注射D-半乳糖6周;Na组自然喂养4周后,注射0.9%Nacl6周;Ds组自然喂养4周后,注射D-半乳糖并且进行60min/d游泳训练6周。之后,每组再随机分为2小组:一组做7天Morris水迷宫试验,标记为DM组、NaM组和DsM组,另一组自然喂养7天,标记为DN组、NaN组、和DsN组,共6组。取大鼠的大脑组织测定各组大鼠大脑SOD、GSH-PX活性及MDA含量,检验D-半乳糖致衰老模型造模是否成功及有氧运动对SOD、GSH-PX活性及MDA含量的影响;用Morris水迷宫检测各组大鼠的学习记忆能力;real-time PCR、Western-blot、免疫荧光检测各组大鼠海马GAP-43基因mRNA和蛋白的表达及定位情况。结果:1、一般形态观察结果:D组与Na组相比,精神不振、行动迟缓、嗜睡、皮毛卷曲枯黄、无光泽,毛发严重脱落等衰老症状明显。2、自由基检测结果:DM组SOD活性非常显著性低于NaM组(P<0.01),GSH-PX活性显著性低于NaM组(P<0.05), MDA含量非常显著性高于NaM组(P<0.01); DsM组SOD、 GSH-PX活性非常显著性高于DM组(P<0.01),MDA含量非常显著性的低于DM组(P<0.01);DsM组和NaM组的SOD、GSH-PX活性和MDA含量均无显著性差异(P>0.05)。DN组SOD、GSH-PX活性非常显著性低于NaN组(P<0.01),MDA含量非常显著性高于NaN组(P<0.01);DsN组SOD活性非常显著性高于DN组(P<0.01),GSH-PX活性显著性高于DN组(P<0.05),MDA含量非常显著性低于DN组(P<0.01);DsN组和NaN组SOD、GSH-PX活性和MDA含量均无显著性差异(P>0.05)。3、Morris水迷宫定位航行实验结果:DM组第3天形成空间记忆,NaM组和DsM组第2天空间记忆初步形成,NaM组第3天形成稳定的空间记忆,DsM组第4天形成稳定的空间记忆。空间探索实验结果:DM组较NaM组第1象限入水穿越原站台次数非常显著性减少(P<0.01);DsM组较DM组第1象限入水穿越原站台次数显著性增加(P<0.05)。4、海马GAP-43mRNA检测结果:DM组较NaM组海马GAP-43mRNA表达量非常显著性下降(P<0.01);DsM组较DM组表达量非常显著性提高(P<0.01);DsM组较NaM相比表达量显著性上调(P<0.05)。DN组较NaN组海马GAP-43mRNA表达量非常显著性下降(P<0.01);DsN组较DN组表达量非常显著性提高(P<0.01);DsN组较NaN组表达量显著性下降(P<0.05)。DM组较DN组,DsM组较DsN组mRNA表达均无显著性差异(P>0.05)。5、海马GAP-43蛋白检测结果:DM组较NaM组海马GAP-43蛋白表达量非常显著性下降(P<0.01);DsM组较DM组表达量非常显著性提高(P<0.01);DsM组较NaM组无显著性差异(P>0.05)。DN组较NaN组表达量非常显著性下降(P<0.01);DsN组较DN组表达量非常显著性提高(P<0.01);DsN组与NaN组表达量显著性下降(P<0.05)。DM组较DN组,DsM组较DsN组,NaM组较NaN组表达均无显著性差异(P>0.05)。6、海马GAP-43免疫荧光检测结果:GAP-43蛋白阳性细胞主要分布于海马CA3区锥体细胞。DM组海马CA3区阳性细胞数量少;NaM组和DsM组海马CA3区阳性细胞数量多。DN组海马CA3区阳性细胞数量较少,细胞排列散乱;NaN组和DsN组海马CA3区阳性细胞数量较多,细胞排列散乱。结论:(1)注射D-半乳糖(100mg/kg/d)6周,可以成功建立大鼠衰老模型。(2)D-半乳糖致衰老过程中进行有氧运动干预,可以维持海马GAP-43基因mRNA和蛋白的正常持续表达,可能是延缓大鼠衰老过程中学习记忆能力衰退的机制之一。
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