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纤维素是自然界中存在最广泛的一类碳水化合物,同时它也是地球上数量最大的再生资源。据不完全统计,全球每年通过光合作用产生的植物物质高达1.55×109t,其中有89%尚未被利用或未被合理利用(如直接焚烧)。目前全世界被开发利用的农林纤维副产物不足2%。因此将这部分可再生资源转变成可利用的能源,不仅可以减轻农业废弃物对环境的污染,更对能源危机的缓解具有重要意义。氢气作为清洁的、高品位二次能资源,越来越受到全世界的关注。在多种制氢方法中,利用微生物厌氧发酵生物质(有机废水、秸秆类农林业废弃物、有机垃圾等)制氢,具备治污、环保和产能等多重优越性,开发前景广阔,已成为各国关注的研究课题。本文从牛粪堆肥中筛选到1株纤维素降解菌G3与2株同步降解纤维素产氢菌(G2、G1),通过对G3进行16S rDNA鉴定,发现与G3最相近的菌株为痢疾杆菌Shigalle flexneri strain FBD002,同源性为99%,对G1和G2的16S rDNA鉴定发现,G1、G2与鹑鸡肠球菌Enterococcus gallinarum strain LMG 13129最相近,同源性也达99%。通过研究发现G3为一株纤维素糖化菌株,以PH-101Avicel为底物发酵40h,G3纤维素糖化率达到48.2%。G3在温度30-40oC和pH6.0-7.0的范围内都可以有效降解纤维素,最佳纤维素降解温度为37oC左右,最佳pH为6.5左右。G3的最适底物浓度5g/l,酵母粉最加添加量为1.5g/l。G1和G2利用纤维素产氢的单位体积产氢量(YH2)分别为97.5ml/L和82.0ml/L。纤维素降解率达到42.6%和36%,G1、G2在温度35-45oC、pH6.5-7.0的范围内都可以有效降解纤维素产氢,最佳纤维素降解温度为40oC左右,最佳pH为6.5左右。G3的最适底物浓度5g/l,氮源(Yesat extract)最适添加量为1.5g/l。实验还用倍比稀释法从瘤胃液中分离得到一组最小的降解纤维素功能菌群(RCB),以5g/l PH-101Avicel为底物,温度40℃,初始pH6.2条件下,RCB纤维素降解率为40%,利用纤维素产氢的单位体积产氢量(YH2)达到70 ml/L。利用G1、G3二株纤维素降解菌和己糖产氢菌B49进行复配产氢实验,发现菌种复配时的纤维素降解和产氢能力大大高于各单菌株能力。尤其是G1+G3+B49二步法复配,静态发酵100h,以PH-101Avicel为底物时,纤维素降率和YH2分别达到60.5%和208.0ml/L。与G1单独发酵时相比,菌种复配的纤维素降解能力提高了20.6%,产氢量提高了53.1%。产氢能力达到4.0 mmolH2/g·纤维素。所以G1+G3+B49是纤维素降解菌与己糖产氢菌的复配方式。将瘤胃中分离得到的降解纤维素最小功能菌群(RCB)与B49二步法复配,结果表明当RCB与B49的接种比例为5:8时,体系有最佳的纤维素降解率与产氢量,分别为55.1%和165.7ml/L,分别较RCB体系的纤维素降解率与产氢量提高了27.2%和51.5%。