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钙(Calcium,Ca)元素是蛋鸡产蛋周期的关键营养素之一,锌(Zinc,Zn)元素则是蛋鸡机体内生理代谢过程必需的微量元素之一。Ca和Zn元素均可通过蛋鸡体内的一系列代谢和生理过程影响蛋鸡的骨骼健康与蛋壳品质。本论文以蛋鸡为试验对象,研究钙或锌的日动态饲喂(每天上午和下午分别饲喂含不同水平Ca和Zn的饲粮,但每天饲喂的饲粮总Ca和Zn水平保持不变)对产蛋鸡生产性能和蛋品质的影响,同时探讨其对血清和胫骨Ca、磷(Phosphorus,P)和Zn昼夜变化的影响及其调控机制,旨在为蛋鸡精准营养提供新的思路。一、钙日动态饲喂对蛋鸡钙、磷和锌昼夜变化的影响及其调控研究试验选取相同饲养管理条件下的同批次41周龄的180只海兰褐产蛋鸡,随机分为三个组,分别为对照组(CON组)、早低晚高组(LH组)和早高晚低组(HL组),每组6个重复,每个重复10只。试验周期10周,期间每天饲喂两次,即早上07:30和下午15:30。每天15:30饲喂前清扫并记录前次剩余的饲料,21:00清扫并记录前次剩余的饲料。其中,对照组全天均饲喂基础饲粮(3.4%Ca);LH组早上饲喂低钙饲粮(3.2%Ca),下午饲喂高钙饲粮(3.6%Ca);HL组早上饲喂高钙饲粮,下午饲喂低钙饲粮。统计采食量、产蛋量等生产性能数据。饲喂试验最后一天从00:00时间点开始,每隔8个小时、每个重复宰杀一只鸡,采血样、左腿胫骨、空肠及肾脏样品,每个重复随机选4枚鸡蛋进行分析。试验结果表明:1.钙日动态饲喂显著影响了蛋鸡上午钙的摄入量,与CON组相比,HL组蛋鸡摄入的钙在上午较高(P<0.05)。同时,HL组较LH组的料蛋比显著降低(P<0.05)。在00:00时间点,LH组蛋鸡肾脏CA的m RNA相对表达量显著上调(P<0.05);而在16:00时间点,HL组蛋鸡肾脏CA和LH组蛋鸡肾脏SOD、GPX1的m RNA相对表达量显著下调(P<0.05)。2.CON组蛋鸡血清和胫骨的Zn水平在16:00时间点较08:00时间点显著降低(P<0.05);LH组中,蛋鸡血清的P水平在16:00时间点较00:00时间点显著降低(P<0.05)。与CON组相比,在00:00时间点,LH组显著降低了蛋鸡血清的Ca水平和Ca:P的比值,HL组显著降低了蛋鸡血清的Ca水平和Ca:Zn的比值(P<0.05),而,HL组蛋鸡胫骨的Ca:Zn比值则显著提高(P<0.05)。在08:00时间点,LH组蛋鸡血清的Ca:P的比值显著降低(P<0.05)。此外,在16:00时间点,LH组蛋鸡血清的Ca、Zn水平和胫骨的Ca:Zn比值,及HL组蛋鸡胫骨的Ca:P比值显著降低(P<0.05)。3.与CON组相比,在00:00时间点,LH组蛋鸡肾脏PMCA和Ca BP的m RNA相对表达量显著上调(P<0.05),而HL组蛋鸡肾脏PMCA的m RNA相对表达量显著下调(P<0.05);同时,LH组蛋鸡在08:00和16:00时间点肾脏PMCA、Ca BP的m RNA相对表达量显著下调(P<0.05)。此外,HL组蛋鸡空肠CLOCK和BMAL1在00:00时间点、16:00时间点以及肾脏CLOCK在00:00时间点的m RNA相对表达量显著下调(P<0.05)。二、锌日动态饲喂对蛋鸡钙、磷和锌昼夜变化的影响及其调控研究试验选取相同饲养管理条件下的同批次21周龄海兰灰蛋鸡162只,随机分成三个处理组,分别为对照组(CON组)、早低晚高组(LH组)和早高晚低组(HL组),每个处理组6个重复,每个重复9只鸡。试验周期10周,期间每天饲喂两次,即早上05:30和下午15:30。每天15:30饲喂前清扫并记录前次剩余的饲料,21:00清扫并记录前次剩余的饲料。其中,对照组全天均饲喂对照组饲粮(添加60mg/kg Zn);LH组早上饲喂低锌饲粮(添加0 mg/kg Zn),下午饲喂高锌饲粮(添加120 mg/kg Zn);HL组早上饲喂高锌饲粮,下午饲喂低锌饲粮。统计采食量、产蛋量等生产性能数据。试验最后一天从00:00时间点开始,每隔8个小时、每个重复杀一只鸡,采血样、左腿胫骨、十二指肠及蛋壳腺样品,此外,每个重复随机捡4枚鸡蛋进行分析。试验结果表明:1.LH组和HL组的Zn摄入量在上午和下午均呈显著性差异(P<0.05)。与CON组相比,LH组和HL组的料蛋比显著降低(P<0.05)。在00:00时间点,LH组和HL组蛋鸡血清的总抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)值和铜锌超氧化物歧化酶(Cu Zn-superoxide dismutase,Cu Zn-SOD)活性显著提高(P<0.05);在16:00时间点,HL组蛋鸡血清碳酸酐酶(Carbonic anhydrase,CA)活性和LH组蛋鸡的血清碱性磷酸酶(Alkalne phosphatatase,ALP)活性提高(P<0.05)。HL组蛋鸡在08:00时间点的血清丙二醛(Malonaldehyde,MDA)值和LH组蛋鸡在16:00时间点的血清ALP活性显著降低(P<0.05)。此外,LH组蛋鸡十二指肠CA在00:00时间点,HL组蛋鸡十二指肠ALP和蛋壳腺ALP、SOD在16:00时间点的m RNA相对表达量显著上调(P<0.05)。LH组蛋鸡蛋壳腺CA在00:00时间点、08:00时间点,及HL组蛋鸡蛋壳腺CA在08:00时间点的m RNA相对表达量显著下调(P<0.05)。2.CON组蛋鸡血清Zn水平在16:00时间点较00:00时间点显著降低(P<0.05);LH组蛋鸡血清Ca水平在00:00和16:00时间点较08:00时间点显著升高(P<0.05),P元素水平在00:00时间点也显著升高(P<0.05);与00:00时间点相比,LH组蛋鸡胫骨P元素水平在08:00和16:00时间点显著降低(P<0.05);而且,与08:00时间点相比,LH组蛋鸡胫骨Zn元素水平在00:00和16:00时间点也显著降低(P<0.05)。与CON组相比,LH组和HL组鸡蛋蛋黄Ca水平,Ca:P和Ca:Zn比值显著降低(P<0.05);在00:00时间点,HL组蛋鸡血清P水平显著提高,Ca:P比值显著降低(P<0.05);在08:00时间点,LH组蛋鸡血清Ca水平显著降低,胫骨Ca和Zn水平显著提高(P<0.05);在16:00时间点,HL组蛋鸡血清Zn水平显著提高,Ca:Zn的比值显著降低(P<0.05)。3.与CON组相比,在00:00时间点,LH组蛋鸡十二指肠Zn1的m RNA相对表达量水平显著上调(P<0.05),但是,LH组蛋鸡十二指肠NCX1、LH组和HL组蛋鸡蛋壳腺Ca BP、Zn1和Zn5的m RNA相对表达量显著下调(P<0.05)。HL组蛋鸡十二指肠Zn5在08:00时间点,蛋壳腺Zn5在16:00时间点的m RNA相对表达量显著下调(P<0.05);而蛋壳腺Ca BP、NCX1的m RNA相对表达量在16:00时间点则显著上调(P<0.05)。HL组蛋鸡十二指肠Per2 m RNA相对表达量在00:00时间点显著上调(P<0.05);HL组蛋鸡蛋壳腺Cry1和Per3的m RNA相对表达量在08:00时间点,LH组蛋鸡蛋壳腺Cry2以及HL组蛋鸡十二指肠CLOCK、Cry2、Per2和Per3的m RNA相对表达量在16:00时间点显著上调(P<0.05);HL组蛋鸡十二指肠BMAL1的m RNA相对表达量在16:00时间点显著下调(P<0.05)。综上,钙和锌日动态饲喂分别影响了上午和下午的钙和锌摄入量;相对于LH组,HL钙日动态饲喂改善了料蛋比;相对于对照组,LH和HL锌日动态饲喂均改善了料蛋比;均影响了蛋鸡体内的生物节律相关基因的m RNA的相对表达量,进而影响了蛋鸡体内的代谢及抗氧化状态,影响了Ca、P和Zn元素在蛋鸡血清和胫骨的昼夜变化;钙和锌日动态饲喂对改进蛋鸡精准营养具有重要意义。