AGO2也被称为EIF2C2,是Argonaute蛋白质家族中的一员。AGO2是RISC的核心组成部分,可以通过si RNA或者mi RNA介导的基因沉默降解靶m RNA。AGO2还可以在翻译水平上抑制基因的表达。AGO2在mi RNA的生物发生中扮演着重要的角色。在细胞核中发现了AGO2的存在,并且在染色质的异染色质化,基因的可变剪接以及DNA双链损伤的同源重组修复中发挥作用。我们通过使用AGO2的抗体做免疫共沉淀实验然后质谱检测,结果发现DDX21是与AGO2有潜在的相互作用的蛋白。DDX21是DEAD box解旋酶家族的一员,DDX21这个蛋白同时具有RNA解旋酶和折叠酶活性。DDX21在核糖体生物发生的许多过程起重要的作用。此外,DDX21还具有协助转录因子激活转录的作用。本论文采用免疫荧光,免疫共沉淀以及GST-pulldown的实验方法研究了AGO2与DDX21的相互作用。免疫荧光和免疫共沉淀的实验结果显示,AGO2与DDX21在细胞核内有共定位而且存在相互作用。接着用AGO2的GST融合蛋白与DDX21的His融合蛋白做GST-pulldown实验,结果显示DDX21在体外不能直接结合AGO2。为了确定AGO2与DDX21之间相互作用的媒介,在免疫共沉淀的体系里加入RNase A,结果显示加入RNase A减弱了AGO2与DDX21的相互作用。因此AGO2与DDX21之间的相互作用与RNA有关。接着在HeLa细胞中过表达AGO2或者DDX21,用Western Blot检测DDX21或者AGO2蛋白水平的变化。结果显示过表达DDX21可以上调AGO2的蛋白水平,但是过表达AGO2对DDX21的蛋白水平没有影响。另外发现DDX21上调的是细胞核内AGO2的蛋白水平。有文献报道AGO2可以影响SMN2的可变剪接。接着在HeLa细胞中过表达DDX21,然后用半定量PCR检测SMN2的可变剪接变化。结果显示过表达DDX21影响了SMN2的可变剪接。综上所述,本论文确定了AGO2与DDX21之间存在相互作用,并且这种相互作用与RNA有关。进一步发现了DDX21可以上调细胞核内的AGO2的蛋白水平,并且影响了AGO2影响的可变剪接。