层析法分离凝集素、细胞色素C、肌红蛋白以及应用于含血红素蛋白的相互作用的研究

来源 :暨南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lynacc
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
环节动物S型凝集素在结构和生化性质上都有别于一般的S型凝集素。根据其性质,本研究采用惰性分子筛填料Sepharose CL-6B作为亲和层析介质对蚯蚓S型凝集素进行了纯化。以EDTA-MEPBS(2 mmol/L EDTA,4 mmol/Lβ—巯基乙醇,150 mmol/L NaCl,20 mmol/L磷酸盐pH7.2)作为平衡液和氨水(150mmol/L,pH10.5)作为洗脱液得到的蛋白质经SDS—PAGE、凝血实验及荧光检测等证明了其为蚯蚓S型凝集素。本法一个步骤即可从蚯蚓提取液分离到电泳纯的S型凝集素,比起传统方法来更加快捷高效,优越性明显。此方法的应用将有利于对环节动物S型凝集素的深入研究。本研究利用Q Sepharose XL阴离子交换层析法从猪心分离肌红蛋白和细胞色素C。通过实验,发现在pH7.6-8.5的范围内,细胞色素C可以牢固地结合于Q Sepharose XL阴离子交换柱上,肌红蛋白结合强度较低,而大多数的杂蛋白则基本没有结合。因此,在pH7.9条件下上样,pH7.2洗脱就可以将三者分离。通过SDS-PAGE及蛋白相对含量分析表明,通过这一步,肌红蛋白和细胞色素C的纯度分别为89.7%和93.2%。将所得的两样品,再分别进行Sephadex G-75凝胶层析,得到了电泳纯的肌红蛋白和细胞色素C。最终,得到的肌红蛋白和细胞色素C的产量分别为77.43 mg/kg.和84.56 mg/kg。此实验表明,可以通过QSepharose XL阴离子交换层析从猪心快速分离肌红蛋白和细胞色素C。利用亲和层析法研究人血红蛋白、蚯蚓的血红蛋白、马肌红蛋白和马心细胞色素C彼此间的亲和作用。结果表明蚯蚓血红蛋白、人血红蛋白与其他几种含血红素蛋白质间均存在亲和力,并发现这种亲和力的大小与它们间相似性有一定的关系。
其他文献
随着经济和科学技术的超速发展,煤矿机械设计者们要根据实际情况设计及制造出具有后期维护成本低,人工使用操作简便,智能化水平不断提升等的煤矿机械用具,来满足矿山开采企业
<正>时至今日,放射治疗仍是恶性肿瘤治疗的重要手段,广泛应用于治疗鼻咽癌、乳腺癌、食管癌等恶性肿瘤。电离辐射在杀灭肿瘤细胞的同时,对正常细胞亦产生生物效应和破坏作用,
随着城镇化进程的加快,农村主要劳动力的转移和以玉米为主的农产品价格持续低迷,农业生产结构和农业经营格局正在逐年发生变化,土地分散碎化条块分割、老弱妇女种田,农业副业
我们不会让不诚信的现象在报达发生,也希望家庭服务企业都从自己做起,这样行业诚信才会有整体的提升,这至关重要。——哈尔滨报达家政有限公司总经理张永刚2014年年末,哈尔滨
拟南芥既是重要的生物学科研材料,又是代表性模式植物。虽然国际上有成熟的拟南芥种植技术,但并不适用于一般生物学实验室。影响拟南芥生长发育的环境条件、理化因素较多,分析和
【正】 在当前的经济生活中,市场零售物价指数上升是否会超过人民群众的承受能力,货币发行量是否会超过合理的限度,这是与千家万户的实际收入水平和日常物质生活息息相关的重
传统的嵌入式产品只能实现某种特定的功能,不能满足用户可变的丰富多彩的应用需求。为解决这个问题,本文设计了基于Linux下,用Java语言开发的嵌入式系统,以实现无线网络技术的远
随着国内和国际经济的发展,以及中国经济进一步融入世界经济,中国需要更加灵活的汇率制度来应对来自内部和外部的挑战.因此,继续盯住美元的汇率政策已不符合经济发展新形势的
本文介绍了OpenGL在图形绘制方面的强大功能,并详细讨论了如何通过绘制描述表将OpenGL调用链接到设备描述表,使得在VisualC++集成开发环境下可以调用OpenGL函数,从而实现利用VisualC++为OpenGL程序设计人机交互界面。
文中介绍了结合Internet认证服务器和域服务器来构建虚拟校园网的过程,并通过配置ISA服务器策略来加强访问控制。