塑料冷包埋骨髓活组织免疫组化技术对急性髓细胞白血病的相关研究

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目的:通过采用细胞染色及形态学方法、塑料冷包埋骨髓活组织免疫组化技术以及流式细胞术三种方法对急性髓细胞白血病的分型诊断进行综合分析及初步研究,探讨不同方法对急性髓细胞白血病分型诊断的意义,进一步明确塑料冷包埋骨髓活组织免疫组化技术对急性髓细胞白血病的临床应用价值。  方法:根据FAB标准分类收集58例为急性髓细胞白血病任一型的患者(通过镜下观察染色的骨髓涂片形态学特征进行初步分型),按照操作标准采集并保存骨髓活检标本及骨髓液,采用塑料冷包埋骨髓活组织免疫组化技术对骨髓活检标本进行检测,确定其相关免疫分子检测结果;同时骨髓液标本采用流式细胞术进行免疫分型检测,然后将三者的结果进行比较,评价塑料冷包埋骨髓活组织免疫组化技术的准确率和检出率。  结果:根据形态学表现58例病例中无法进行急性髓细胞白血病亚型分型者高达46例;而采用了塑料冷包埋骨髓活组织免疫组化技术完善免疫学特征后,仅有9例未能明确急性髓细胞白血病的亚型分型;经流式细胞仪检测,58例急性白血病中,其中57例结合临床及细胞形态学、细胞遗传学、基因检测等综合判断结果为M0型11例,M2型4例,M3型6例,M4型8例,M5型11例,M6型9例,M7型3例,其中M2型中有2例更详细的分为了AML-M2b,其余5例只能排除其为非淋系白血病,具体分型无法知晓,有1例无法确定为是急性髓细胞白血病还是骨髓异常综合征。从确诊分型率等来看,塑料冷包埋骨髓活组织免疫组化分型明显优于形态学分型,前者达到了84.2%,而后者仅为19.2%(P<0.05)。将形态学分型的确定结果与塑料冷包埋骨髓活组织免疫组化分型结果进行比较,两者的分型相符率为26.2%,另外有一例镜检结果符合骨髓增生异常综合征之骨髓活组织图像两者并无争议。通过统计学方法分析,研究中采用的塑料冷包埋骨髓活组织免疫组化技术与流式细胞术这两种方法对不同抗体的检测结果基本一致(P>0.05)。  结论:(1)单纯细胞染色及形态学分型对分型诊断形态学非典型急性髓细胞白血病效果较差,但对典型病例则有较好辨别性;结合免疫学综合分析后,其效果会得到显著提升。  (2)不同于传统石蜡包埋骨髓组织,塑料冷包埋骨髓活组织免疫组化技术采用塑料包埋技术,应用了特选的固定剂(冷丙酮),并确定了其独创性的的最佳实验条件,达到了最大程度保全组织抗原以及组织形态的特色,是一项有效应用于骨髓活组织的新型免疫组化技术。  (3)塑料冷包埋骨髓活组织免疫组化技术应用于急性髓细胞白血病的分型检测中,明显优于单纯细胞染色及形态学分型,其抗原检测结果与流式细胞术检测结果具有较高一致性,提示该方法具有较高的临床应用价值。  (4)塑料冷包埋骨髓活组织免疫组化技术是一项能够很好地应用于骨髓活组织免疫组化检测的改良新技术,尤其是应用于某些骨髓穿刺干抽的患者,解决了这类患者用流式细胞术检测时标本采集困难的问题。其实用性毋庸置疑,有望成为除流式细胞术之外的一项新兴可推广技术。  综上,塑料冷包埋骨髓活组织免疫组化技术在对急性髓细胞白血病分型中有其独特的临床价值,为临床急性髓细胞白血病的分型诊断提供参考价值,进一步指导临床治疗方案。
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