γ干扰素联合甲强龙对人胚肺成纤维细胞的影响

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目的:观察γ干扰素(interferon-gamma, IFN-γ)联合甲强龙(methylprednisolone, M-pred)对人胚肺成纤维细胞(human embryonic lung fibroblast, HELF)增殖、胶原合成及转化生长因子β1(transforming growth factor-beta one, TGF-β1)蛋白与mRNA表达的影响,旨在通过研究IFN-γ与M-pred联合应用的体外实验探讨两药联合应用对肺间质性疾病的治疗效果,为临床治疗提供理论依据。方法:将HELF于37℃,5% CO2,饱和湿度条件下,含10%新生牛血清,青霉素100 U/ml,链霉素100μg/ml的RPMI 1640培养液中传代培养,待细胞进入对数生长期后进行实验操作。采用2×4析因设计法进行实验设计,按M-pred( 0, 15μg/ml)和IFN-γ(0, 250, 500, 750U/ml)分为AH 8个组,A组:M-pred 0μg/ml+IFN-γ0U/ml,即对照组;B组:M-pred 15μg/ml,即M-pred单独应用组;C~E组为不同浓度IFN-γ单独应用组,分别为:IFN-γ250U/ml、500U/ml、750U/ml;F~H组为M-pred与不同浓度IFN-γ联合应用组,分别为:M-pred 15μg/ml+IFN-γ250U/ml,M-pred 15μg/ml+IFN-γ500U/ml,M-pred 15μg/ml+IFN-γ750U/ml。药物作用于HELF 48h后,进行以下实验:1应用噻唑蓝(MTT)法观察HELF的抑制率:将细胞以1×105/ml的密度接种于96孔培养板,加入药物,经MTT处理,二甲基亚枫终止反应。分别测定各组570nm波长处吸
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