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研究背景糖尿病是由于人体内胰岛素缺乏或相对缺乏所致的一种慢性内分泌代谢性疾病,患病人数逐年增加,到2030年世界范围内预计达到4.38亿,40%的糖尿病患者会进展为糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy, DR)。DR是糖尿病患者最常见的微血管并发症之一,是成年人最常见的致盲性眼病。大量研究显示多种因素通过多种途径参与DR的发病过程,其中,遗传因素在DR发病中起到重要作用。已发现促红细胞生成素(erythropoietin, EPO)和转录因子7类似物2(transcription factor7like2, TCF7L2)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)与高加索人群DR发病有明显的相关性。EPO是一种促进红细胞生成的糖蛋白,在DR发病过程中发挥双重的作用：在DR早期,EPO呈高表达,保护视神经,防止视网膜细胞的死亡,保护血视网膜屏障；DR晚期,EPO增强血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)的作用,促进视网膜新生血管形成,形成增殖性糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy, PDR)。TCF7L2是一种高度变异的转录因子,在调控胰岛β细胞分泌胰岛素、胰岛素抵抗、维持血糖稳态和Wnt信号途径中发挥重要作用。研究证实胰岛素抵抗的患者比胰岛素敏感的患者更易发生DR。Wnt信号通路在调控增殖性视网膜病变的病理性血管形成过程中发挥重要作用。本研究针对EPO和TCF7L2基因多态性与2型糖尿病(type2diabetes mellitus, T2DM)患者的DR发病的相关性做了一些工作。研究目的观察EPO基因多态性(rs1617640, rs507392和rs551238)和TCF7L2基因多态性(rs11196205)与T2DM患者的DR疾病易感性的相关性,探讨基因多态性在T2DM患者的DR发病过程中的作用。研究方法本研究为病例对照研究,包含792例T2DM患者,其中病例组设为DR患者,共448例,其中PDR患者220例,非增殖性糖尿病视网膜病变(non-proliferative diabetic retinopathy, NPDR)患者228例,对照组设为无视网膜病变(diabetes with no retinopathy, DNR)T2DM患者,共344例。抽提所有T2DM患者基因组DNA,采用聚合酶链式反应-连接酶检测反应(polymerase chain reaction-ligase detection reaction, PCR-LDR)技术,对EPO基因多态性(rs1617640,rs507392和rs551238)和TCF7L2基因多态性(rs11196205)进行分型。应用t检验和X2检验对各组患者的基本资料包括性别,年龄,病程,血脂,血糖,糖化血红蛋白水平进行分析。计算各位点等位基因及基因型频率,并进行Hardy-Weinberg平衡检测；应用X2检验,比较各组等位基因频率分布差异,采用dominant、recessive和additive模型比较各组基因型频率分布差异。应用SHEsis和Haploview软件对EPO基因3个位点分别进行连锁不平衡(linkage disequilibrium, LD)(?)口单倍体型分析。以p<0.05表示差异有统计学意义。结果(1) EPO SNP rs1617640等位基因结果：等位基因G的频率在DR和DNR组间、PDR和DNR组间、NPDR和DNR组间比较,差异无统计学意义(p>0.05)。基因型结果：采用dominant、recessive和additive模型,基因型GG、GT、TT频率分布在DR组和DNR组间、PDR组和DNR组间、NPDR组和DNR组间比较,差异无统计学差异(P＞0.05)。(2) EPO SNP rs507392等位基因结果：等位基因C的频率分布在DR和DNR组间、PDR和DNR组间、NPDR和DNR组间比较,差异无统计学意义(p>0.05)。基因型结果：采用recessive模型,与DNR组比较,基因型CC频率在DR(OR=0.44,95%CI:0.22-0.86,p=0.012)和PDR组(OR=0.19,95%CI:0.06-0.66,p=0.003)均明显降低,差异有统计学意义;NPDR组和DNR组间比较,差异无统计学意义(p>0.05)。采用additive模型,与DNR组比较,基因型CC频率在DR组(OR=0.45,95%CI:0.23-0.89,p=0.027)和PDR组(OR=0.18,95%CI：0.05-0.63,p=0.002)均明显降低,差异有统计学意义；NPDR组和DNR组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。采用dominant模型计算,DR组和DNR组间、PDR组和DNR组间、NPDR组和DNR组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。(3) EPO SNP rs551238等位基因结果：与DNR组比较,等位基因C频率在PDR组中明显降低(OR=0.72,95%CI:0.52-0.99,p=0.049); DR和DNR组间、NPDR和DNR组间比较,差异无统计学意义(p＞0.05)。基因型结果：采用recessive模型,与DNR组比较,基因型CC频率在DR组(OR=0.40,95%CI:0.20-0.79,p=0.010)和PDR组(OR=0.18,95%CI：0.05-0.61,p=0.002)均明显降低,差异有统计学意义；NPDR组和DNR组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。采用additive模型,与DNR组比较,基因型CC频率在DR组(OR=0.42,95%CI:0.21-0.83,p=0.016)和PDR组(OR=0.18,95%CI：0.05-0.62,p=0.002)均明显降低,差异有统计学意义；NPDR组和DNR组间比较,差异无统计学意义(p>0.05)。采用dominant模型,DR组和DNR组间、PDR组和DNR组间、NPDR组和DNR组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。(4)连锁不平衡和单倍体型分析连锁不平衡分析显示EPO基因SNP位点rs1617640,rs507392和rs551238存在显著连锁不平衡(D’>0.90)。对三个位点的单倍体型分析,未发现单倍体与DR、PDR和NPDR发病易感性之间存在显著的相关性。(5)TCF7L2SNP rs11196205等位基因结果：等位基因C的频率分布在DR和DNR组间、DR和DNR组间、NPDR和DNR组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。基因型结果：采用dominant模型,基因型CC、CG、GG频率分布在DR和DNR组间、PDR和DNR组间、NPDR和DNR组间比较,差异无统计学意义(p>0.05)。结论EPO基因SNP位点rs507392和rs551238与T2DM患者DR和PDR发病具有显著相关性,携带基因型CC患者DR和PDR疾病易感性相对降低。EPO基因SNP位点rs1617640和TCF7L2基因SNP位点rs11196205与DR和PDR疾病易感性之间未发现显著的相关性。