本文对以淀粉为原料酶法制备海藻糖的过程进行了进一步研究,优化了细胞破碎方法并通过酶固定化进一步提高酶的利用率和海藻糖的产量。由于通过发酵得到的低聚麦芽糖苷基海藻糖合成酶(MTSase)和低聚麦芽糖苷基海藻糖水解酶(MTHase)均属于胞内酶,必须通过细胞破碎释放出来。通过比较各种破碎方法,确定了甲苯破碎法为实验室破碎方法,得到最优的破碎处理条件:甲苯用量5%,处理时间45min,处理温度30℃。本文对利用固定化方法纯化海藻糖合成酶进行了初步研究,发现经壳聚糖涂层的滤纸可选择性地固定化麦芽糖合成酶,并可使残酶液的海藻糖合成能力异常提高,在各优化条件下,海藻糖最终质量分数达到了22.72g/L,转化率达到了54%,且反应时间缩短为9hr。据初步分析,可能是戊二醛对酶有保护作用并促进了酶的释放,而壳聚糖载体则可能吸附了一些酶的抑制剂,从而起到了增强酶活的作用。此外,本文还研究MTSase和MTHase此双酶系统的固定化过程。通过比较多种载体的固定化效果,最后选定了60～80目的6201型担体作为固定化载体,并对此固定化过程中的各个条件进行了优化,最终得到的固定化比酶活为27.32U/克载体,酶回收率为79%。同时发现经过固定化载体处理后的残酶液还表现出较高的酶活,说明固定化尚不完全,需要进一步优化固定化条件或者进行二次固定化。