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目的:探讨中药复方脑疏宁对急性期缺血性脑卒中神经再生的影响,及其发挥神经再生作用可能存在的分子调节机制,以期丰富中药治病的基础理论知识,为缺血性脑卒中提供新的治疗方案。方法:通过文献研究法整理分析脑疏宁组方中“君”药益母草的植物生态学特性及其药理等方面的研究进展;以体外分离培养并经过鉴定的大鼠胎鼠神经干细胞(NSCs)作为研究对象,设置脑疏宁梯度浓度(21.4 mg/mL、2.14 mg/mL、214 μ g/mL、21.4 μ g/mL、2.14 μ g/mL、0)分别干预NSCs 24小时和48小时后,以WST-1细胞增殖及细胞毒性检测脑疏宁对NSCs的作用;以浓度为50 μ M的抑制剂U0126和LY294002分别损伤处理NSCs 6小时后,培养基中加入浓度为21.4μg/mL的脑疏宁继续培养24小时,通过WST-1细胞增殖及细胞毒性检测及Image J神经球计数分析脑疏宁对NSCs损伤模型的影响;利用浓度为50 μM的抑制剂U0126和LY294002分别制备MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路阻断的NSCs模型,并给予脑疏宁(21.4 μ g/mL)干预处理,Western Blot法检测细胞MAPK/ERK信号通路中p-ERK1/2和p-Raf-1 Ser259蛋白以及PI3K/Akt信号通路中p-Akt蛋白的表达水平。结果:整理出益母草中包括生物碱,二萜类,黄酮类等化合物共有157种;与对照组相比,在一定浓度范围内脑疏宁能促进NSCs增殖,而高浓度脑疏宁具有细胞毒性,抑制NSCs增殖,浓度为21.4 μ g/mL的脑疏宁处理NSCs 24小时可以明显促进NSCs增殖(p<0.05);浓度为21.4 μ g/mL的脑疏宁能够明显改善抑制剂U0126和LY294002对NSCs造成的损伤(p<0.05);Western Blot结果显示,与对照组相比,脑疏宁处理组中p-ERK1/2蛋白表达明显升高(p<0.05),而p-Akt蛋白没有改变,在MAPK/ERK信号通路阻断的细胞模型中,脑疏宁促进p-Akt蛋白和在总蛋白Raf-1中p-Raf-1 Ser259蛋白的表达(p<0.05),在PI3K/Akt信号通路阻断细胞模型中,脑疏宁促进p-ERK1/2蛋白的表达(p<0.05),而在总蛋白Raf-1中p-Raf-1 Ser259蛋白的表达水平降低(p<0.05)。结论:脑疏宁适宜的浓度与时间处理能够促进NSCs增殖,这一结果可能是通过刺激MAPK/ERK信号通路中ERK1/2蛋白磷酸化实现的;脑疏宁作用于缺血性脑卒中神经再生可能存在的内在机制是:在缺血期,通过降低抑制Raf-1磷酸化Ser259位点的活性,同时促进ERK1/2蛋白的磷酸化来活化MAPK/ERK信号通路;在再灌注期,通过活化Akt和抑制Raf-1的磷酸化来减轻ERK1/2对PI3K/Akt信号通路中Akt的抑制。