经血源性子宫内膜间充质干细胞体外分离培养及初步鉴定

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhouheng19850
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目的:体外分离培养女性经血源性的子宫内膜间充质干细胞(MenSCs),并进行初步鉴定。  方法:采用Percoll密度梯度离心法,从女性月经血中分离出子宫内膜间充质干细胞,进行传代培养;观察细胞的形态及生长特性;免疫荧光法测定经血源性的子宫内膜间充质干细胞的Vimentin阳性表达;采用流式细胞仪检测细胞表面标记物CD90和CD146在经血源性的子宫内膜间充质干细胞中的阳性表达。  结果与结论:采用Percoll密度梯度离心的方法能够从女性月经血中筛选出子宫内膜间充质干细胞,原代细胞培养至7天左右时,细胞能达到80%左右的融合,细胞紧密排列,呈现出旋涡状、辐射状的集落样生长。传代后的细胞生长稳定,以纤维样细胞为主。免疫细胞学检查结果显示MenSCs呈扁平的梭形或多边形,细胞核呈蓝色荧光,胞浆呈绿色荧光。证实培养的细胞为Vimentin(波形蛋白)阳性基质细胞。流式细胞仪检测结果显示,来源于经血的子宫内膜间充质干细胞表现出CD90强阳性表达,低表达CD146。通过对第1,3代MenSCs流式细胞术检测结果的分析,得出第3代MenSCs细胞表面标志物阳性表达率较第1代高,初步说明通过细胞传代培养的方法可以进一步纯化细胞。
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