中药海风藤的生药学研究

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中国药典(2005版)收载海风藤为胡椒科植物风藤Piper Kadsura(Choisy)Owchi的藤茎,具有祛风湿、通经络的功能,用于治疗风寒湿痹、关节疼痛、筋脉拘挛、跌打损伤。调查发现,植物风藤Piper Kadsura(Choisy)Owchi的分布范围窄,仅在福建、海南等地有零星的分布,风藤的植物资源极度匮乏。而与风藤同科(胡椒科)同属(胡椒属)的植物山药Piper hancei分布广,福建、浙江、江西、广东、云南、贵州等地均有分布,资源量多。市场上销用的海风藤鉴定结果表明全国大多数省区应用最广、流通量最大的海风藤的原植物是山药藤茎。本论文采用多种方法对海风藤、山药进行生药学研究。采用常规方法对海风藤、山药进行性状观察,结果发现海风藤、山药药材性状特征极为相似。对其进行横切面、粉末显微观察,结果表明海风藤与山药横切面特征区别不大,且它们粉末特征也很相似。通过理化定性分析,分别取两者的酸性乙醇提取液加入硅钨酸、碘化铋钾、碘化汞钾进行生物碱沉淀反应,结果发现两种药材样品的滤液加入试剂均呈现相同的阳性现象,说明海风藤、山药均含有生物碱成分。向海风藤、山药粉末中先后加乙醇和稀硫酸进行显微化学鉴别,发现二者皆有针状结晶出现,加硫酸后均溶解。由此可见,海风藤、山药组织构造中均含草酸钙结晶。采用光谱和色谱法分析,取海风藤、山药的乙醇浸提液,置于紫外可见分光光度计上,在200-400nm波长内扫描,结果发现海风藤、山药均在270nm附近有吸收峰,说明二者总提物成分具有一定的相似性。取海风藤、山药的乙醇粗提液,分别用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、水饱和的正丁醇萃取,再将每份萃取液稀释15倍,置于紫外可见分光光度计上,于210-700nm波长内扫描,结果发现两药材4个部位的紫外光谱均有一定程度的相似性,由此证明二者在成分方面具有较高的相似性。薄层色谱鉴别采用甲醇超声提取海风藤、山药及海风藤对照药材,过滤,蒸干滤液,残渣加无水乙醇溶解作为供试液,吸取供试品溶液20μl、10μl和对照药材溶液5μl、3μl,分别点于同一CMC-Na硅胶G薄层板上,以石油醚(60-90)-丙酮(15:3)展开,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视,10%硫酸乙醇显色,再置紫外光灯(365nm)下检视。结果发现,海风藤、山药与对照药材三者之间在薄层色谱相应的位置上,显较多相同颜色的主斑点,说明海风藤、山蒟的主要成分有较高的相似性。采用HPLC对海风藤及其对照药材、山蒟中的木脂素、生物碱等有效成分进行比较研究。研究结果表明三者图谱的共有特征峰有15个,表明山蒟含有海风藤的主要成分,而且峰面积的比较结果表明这些成分在山蒟中的含量明显高于海风藤。采用RAPD技术对海风藤、山蒟进行分子水平的鉴定。用植物基因组DNA提取试剂盒提取两者的总DNA,以20条随机引物进行随机扩增,从中筛选出13条有效引物能够证明二者扩增谱带的相似性。该技术操作简单,能快速、有效地从DNA水平上确定海风藤、山蒟的相似之处。
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