【摘 要】
:
微管(microtubule,MT)是细胞骨架的主要成分之一,参与调控植物细胞壁纤维素的合成及沉积,对植物形态建成具有重要作用。微管切割酶Katanin是微管解聚与重聚的重要调节因子,包含一个具有ATPase活性的催化亚基P60和一个调控亚基P80。拟南芥KTN1基因编码Katanin蛋白的P60亚基,具有微管切割活性,通过调控微管骨架的动态变化进而在细胞分裂、激素信号转导、物质运输等多种细胞生命
论文部分内容阅读
微管(microtubule,MT)是细胞骨架的主要成分之一,参与调控植物细胞壁纤维素的合成及沉积,对植物形态建成具有重要作用。微管切割酶Katanin是微管解聚与重聚的重要调节因子,包含一个具有ATPase活性的催化亚基P60和一个调控亚基P80。拟南芥KTN1基因编码Katanin蛋白的P60亚基,具有微管切割活性,通过调控微管骨架的动态变化进而在细胞分裂、激素信号转导、物质运输等多种细胞生命活动中发挥重要作用。目前已报道的与KTN1直接互作的蛋白很少,而实验室前期研究发现拟南芥SAV4能够与KTN1直接互作。本研究以玉米同源KTN1与SAV4蛋白为研究对象,通过生物信息学、分子生物学、遗传学、细胞生物学等方法对其进行基因克隆和功能研究。获得以下实验结果:(1)玉米ZmSAV4a的基因克隆与功能研究首先对拟南芥与玉米的SAV4蛋白进行系统进化分析与蛋白同源性比对,结果表明二者同源性较高;其次,GUS染色实验结果表明SAV4主要在新生的器官和伸长的组织中表达;然后构建ZmSAV4a的二元融合表达载体,转化拟南芥SAV4突变体,获得转基因植物后表型分析发现突变体的表型被回复成野生型表型;最后将上述二元表达表达载体通过农杆菌转化法侵染拟南芥野生型植株,获得ZmSAV4a过表达转基因植物,观察ZmSAV4a定位发现与拟南芥SAV4定位一致。上述实验结果表明SAV4在拟南芥和玉米中的功能保守。(2)玉米ZmKTN1a的基因克隆与功能研究首先对拟南芥与玉米的KTN1蛋白进行系统进化分析和蛋白同源性比对,发现它们之间具有较高的亲缘关系;其次GUS染色实验结果显示KTN1在植物的根、茎、叶部位特异性表达;随后构建ZmKTN1a的二元融合表达载体,获得ZmKTN1a过表达转基因系,表型分析发现ZmKTN1a过表达系呈现出与拟南芥KTN1突变体以及KTN1过表达植株相同的表型;最后观察到ZmKTN1a定位于细胞微管骨架。上述实验结果表明KTN1在拟南芥和玉米中的功能保守。(3)玉米ZmKTN1a与ZmSAV4a蛋白的互作研究利用双分子荧光互补技术(BiFC)研究玉米ZmKTN1a与ZmSAV4a蛋白的相互作用,结果表明二者之间可能存在物理互作。该结果进一步验证KTN1与SAV4在拟南芥和玉米中的功能十分保守。
其他文献
柠条锦鸡儿(Caragana korshinskii)是广泛分布在我国干旱和半干旱地区的豆科锦鸡儿属多年生落叶灌木,因其优异的抗旱能力成为黄土高原退耕还林的优势物种。目前对柠条锦鸡儿的抗旱研究主要集中在对形态描述,生理机制和生态适应性的解析,而对柠条抗旱的分子机制研究尚待加强,实验室前期研究发现柠条在干旱胁迫下水分输导组织更加发达。而HD-ZIPⅢ基因家族在维管束组织细胞分化过程中有重要作用,从而
小麦条锈病严重影响我国小麦安全生产、威胁国计民生。小麦条锈菌作为一类专性活体营养寄生真菌,在侵染过程中通过侵染结构——吸器从寄主细胞吸取营养物质供其生长发育所需。糖类物质是病原菌从寄主细胞获取的最重要的营养形式之一,而糖的转移需依赖糖转运蛋白来实现。本实验室前期研究鉴定得到一个受条锈菌诱导上调表达的糖转运蛋白基因TaSWEET14,通过BSMV-VIGS(virus induced gene si
本研究比较了四株虫草菌的菌丝体和发酵液的醇提物对人宫颈癌细胞Hela细胞生长的影响,在此基础上,筛选出对抑制肿瘤细胞活性差异明显的两株菌从转录组和代谢组的角度对其差异进行比较,以期为虫草菌的开发与利用提供依据。本研究结果如下:1.经鉴定四株虫草菌分离株均属于虫草属真菌Cordyceps memorabilis的无性型Isaria farinosa。2.通过MTT实验,检测了虫草菌八种醇提物对人宫颈
天然木质纤维质原料组成的生物质能源由于储量丰富、可再生、清洁度高等独特优势,对其开发利用的研究工作正越来越受到重视。然而,由于木质素结构的复杂性和难降解性,极大地限制了受其保护免受酶解的天然纤维质原料的可利用性。此外,木质素作为一种造纸工业的副产物,由于很难被降解,排放到环境中后会导致严重的水生态污染。因此对于木质素高效降解菌的筛选驯化及降解途径的研究对生物质能源的利用和污染水体的修复具有理论和实
苯并咪唑在药物设计合成领域是一类非常重要的杂环化合物,在过去的几十年里,苯并咪唑的研究已经受到了人们相当多的关注。由于抗药性问题日趋严重,新型的苯并咪唑类药物急需被开发出来。基于本课题前期对于肉桂酸酯类的研究,将肉桂酸和苯并咪唑结合,设计并合成了2-苯乙烯基苯并咪唑及其衍生物,并系统考察了其抗植物病原真菌的活性,并分析了其构效关系。本实验取得的研究成果如下:(1)以取代肉桂酸或丁酸和取代邻苯二胺合
甜瓜是中国最重要的水果作物之一,甜瓜种植已成为陕西省多县区的主导型产业。设施农业可控性高,集约性强,设施化种植已成为甜瓜的主要栽培模式,随之带来的是日益严重的连作障碍。连作后植株病虫害严重,长势弱,作物产量及品质下降,土壤微生物群落结构失衡。土壤酚酸类物质积累,土壤微生物群落恶化以及根结线虫被认为是导致连作障碍的主要原因,增施生防菌能够有效的减缓连作现象。香豆酸(Coumaric Acid,CA)
草莓具有极高的经济价值和营养价值,也是科学研究的重要植物材料。TCP(Teosinte branched1 Cincinnata Proliferating cell factor)转录因子是一类植物特有的基因,广泛参与植物对生长发育的调控,也有研究报道TCP可能与植物果实发育有关。然而,在草莓中TCP基因的功能研究却少有报道。本课题组前期鉴定了草莓中的TCP基因家族,并进行了详细的生物信息学分析
小热休克蛋白(Small heat shock proteins,sHsps)是热激蛋白家族重要的成员,不仅在生物应对不良环境胁迫中发挥重要作用,而且与昆虫滞育密切相关。麦红吸浆虫Sitodiplosis mosellana(Géhin)是一种典型的具有专性滞育的农业昆虫,滞育过程中经历酷暑和严寒。为弄清sHsps基因在麦红吸浆虫滞育中的作用,探讨其对麦红吸浆虫滞育的调控与激素的关系,本研究采用R
由条形柄锈菌小麦专化型(Puccinia striiformis f.sp.tritici,Pst)引起的小麦条锈病是威胁小麦生产的严重病害。培育和种植抗病品种是防治小麦条锈病最安全、经济、有效的措施。但是,由于小麦条锈菌毒性变异快,容易造成抗病品种抗病性的“丧失”,导致病害不断流行。因而,加快对条锈菌致病机理的认识对小麦条锈病的持久防控具有重要意义。作为活体营养型真菌,小麦条锈菌在侵染过程中形成
在葡萄果实生长发育过程中,果穗的曝光率对果实生长发育及最终果实品质具有重大影响。近年来,摘叶处理作为一种有效的栽培技术手段不断的被推广应用并取得较好效果,但有关摘叶处理对葡萄果实品质指标影响的研究结果不一致,且摘叶处理对葡萄花色苷合成路径调控机理的研究鲜有报道,不同地区因气候差异摘叶的时期和强度也不相同。本研究于2017~2018年以山西省临汾市尧京酒庄的赤霞珠和品丽珠为材料,在浆果转色初期和转色