猪瘟是一种高度传染性疾病,给世界养猪业造成巨大的经济损失。CSFV基因组的第一个蛋白N^pro,具有蛋白水解酶活性,在瘟病毒属中较为保守。N^pro可以对参与IFN-a/β转录的干扰素调节因子3（IRF3）起抑制作用,从而阻碍IFN-a/β的诱导途径。为了筛选出一个表达N^pro蛋白的最佳真核表达载体,从而为下一步研究不同时间段细胞MHC I表达的变化情况,从分子水平上说明N^pro与MHC I之间的关系,本研究克隆了广西典型CSFV流行毒株——梧州株N^pro基因,插入pIRESneo和pcDNA3.0表达载体中,构建了2个真核重组表达质粒。质粒PCR及双酶切鉴定目的片段正确,说明目的基因真核表达载体构建成功。同时发现pcDNA3.0-N^proPCR及酶切鉴定所见的目的片段比pIRESneo-N（pro）的要明显,质粒DNA的OD260/280值也明显比pIRESneo-N^pro的高。构建成功的2个真核表达载体用脂质体转染法进行体外细胞表达,转染30h后检测表达情况。RT-PCR检测见明显目的片段,用His抗体进行间接免疫荧光检测发现N^pro得到表达,并定位于细胞浆。同时发现pIRESneo-N^pro转染后表达的蛋白水平比pcDNA3.0-N^pro高,说明真核表达载体pIRESneo比pcDNA3.0更适合在PK15细胞中表达N^pro蛋白。