【摘 要】
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金属硫蛋白(MTs)是一类低分子量、富含半胱氨酸的金属结合蛋白，广泛存在于细菌、真菌、植物、无脊椎动物和脊椎动物中，因其功能独特，近年来对MT各方面的研究也日益受到重视。它
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金属硫蛋白(MTs)是一类低分子量、富含半胱氨酸的金属结合蛋白，广泛存在于细菌、真菌、植物、无脊椎动物和脊椎动物中，因其功能独特，近年来对MT各方面的研究也日益受到重视。它能够清除体内自由基防治衰老，增强机体对不良环境的适应，参与体内微量元素代谢，解除重金属毒性等作用。MT多基因家族至少含有4个亚型，即MT-Ⅰ、MT-Ⅱ、MT-Ⅲ和MT-Ⅳ。
本研究在前人对MT-Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ研究的基础上，设计特异性引物MT-IVSP1、MT-IVSP2和MT-IVSP3、MT-IVSP4，通过RT-PCR方法从动物组织RNA中扩增出了基因编码区全序列，通过T4DNA连接酶将目的基因连入载体pGEMR-T Vector的SacⅡ和SpeⅠ位点，构建质粒DNA文库。再经过DNA文库的筛选、感受态DHt5a的转染、质粒DNA的提取、限制性酶切以及测序分析后，获得GenBank各物种登录号，牦牛(yak)MT-IV(Accession No.：EF141034)，山羊(goat)MT-IV(AccessionNo.：EF470251)和绵羊MT-IV(sheep)(Accession No.：EF624067)，长度均为189bp，从起始密码子ATG开始到终止密码子TGA结束，所以三段序列均为MT-IV序列的编码区全长。将各序列在NCBI上进行同源性搜索发现，MTolV核苷酸序列在不同动物中都存在C-X-C、C-X-X-C、C-C-X-C-C保守的三肽结构，说明其在进化上十分保守。
本实验第二阶段为对前人所提出的MT-IV基因只存在于复层扁平上皮中的说法进行了实验论证，经过大量的实验证明MT-IV基本没有组织特异性，只存在表达量多少的问题。
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