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目的:分析导师赵泉霖教授治疗糖尿病心肌病的临床用药规律,挖掘出其常用核心药对黄芪当归药对,通过体内实验验证该药对对于糖尿病心肌细胞保护的有效性,体外实验进一步探讨其主要活性成分干预高糖诱导的心肌细胞炎性损伤的作用机制,同时通过基因测序数据挖掘预测有潜在调节作用的相关miRNA,为后期进一步深入探索该病防治理念及挖掘新药治疗提供新思路。
方法:1.通过收集门诊跟诊及病房电子病历系统内导师治疗糖尿病心肌病的有关方药,统计出其相关用药规律,找出关键药对。2.从体内实验验证关键药对对于糖尿病大鼠的一般情况、血脂血糖、超声心动图等方面的有效作用,进一步选用药对最佳活性成分黄芪甲苷、阿魏酸进行体外实验,以深入探索关键药对对于NF-κB相关炎性因子及其信号通路的干预作用。3.将体外实验中高糖干预下的心肌细胞各组进行基因测序,对其数据进行分析挖掘,结合现代生物信息学分析方法,将基因测序信息进行KEGG富集分析及GO分析,预测与炎症反应关系最为密切的高差异表达miRNA。
结果:1.通过门诊及病房电子病历系统共收集有效处方277首,对药物使用频次、分类属性进行分析得出:黄芪(218次)、当归(173次)为最多,以补虚药、活血化瘀药使用频次为最高;同时对临床治疗糖尿病心肌病使用的中药的性味、归经等进行统计,得出温性药、苦味药使用居多,用药归经以肝、脾、心为主;对277首处方中用药频次≥20次的所有药物进行聚类分析与关联规则分析,发现导师临床治疗DCM用药规律,得出导师常用核心药对:黄芪当归药对。2.通过体内实验造模及中药组、二甲双胍组干预,发现黄芪当归药对可以改善模型组一般情况、血糖血脂相关指标、超声心动图心脏血流以及心肌形态学等,证实了黄芪当归药对对于改善糖尿病心肌病的有效性;3.通过体外实验筛选出中药组、模型组、二甲双胍组的最佳干预时间(72h)、最佳浓度(黄芪甲苷:100umol/l,阿魏酸:20umol/l,二甲双胍:200umol/l)、中药组最佳配比(1∶1),行ELISA及Westernblot相关指标检测,可知:药物干预组可明显降低NF-κB通路相关指标(NF-κB、IL-6、TNF-α、MCP-1)的蛋白表达;4.进行基因测序,对差异表达基因进行富集化分析,得出14个高差异表达miRNA,同时进一步使用生物信息学方法挖掘,预测与NF-κB信号通路关系最为密切的靶基因miRNA-4508,提示其可能与干预糖尿病心肌病炎症反应的NF-κB通路有一定的相关性。
结论:
1.糖尿病心肌病的病理属性为本虚标实,以气虚为本,血瘀为标,治疗应以益气活血法为原则。
2.糖尿病心肌病临床治疗导师常用药物以黄芪最多,药味多为苦味药、辛味药、甘味药为主,药性以温味药居多,归于肝、脾、心经,治疗宜以补虚类、活血化瘀类药物为主,临床常用代表药对为黄芪、当归。
3.黄芪当归及其主要活性成分黄芪甲苷、阿魏酸对于可以通过调控NF-κB通路发挥抗炎作用保护心肌细胞,其作用机制可能与miRNA-4508有一定相关性。
方法:1.通过收集门诊跟诊及病房电子病历系统内导师治疗糖尿病心肌病的有关方药,统计出其相关用药规律,找出关键药对。2.从体内实验验证关键药对对于糖尿病大鼠的一般情况、血脂血糖、超声心动图等方面的有效作用,进一步选用药对最佳活性成分黄芪甲苷、阿魏酸进行体外实验,以深入探索关键药对对于NF-κB相关炎性因子及其信号通路的干预作用。3.将体外实验中高糖干预下的心肌细胞各组进行基因测序,对其数据进行分析挖掘,结合现代生物信息学分析方法,将基因测序信息进行KEGG富集分析及GO分析,预测与炎症反应关系最为密切的高差异表达miRNA。
结果:1.通过门诊及病房电子病历系统共收集有效处方277首,对药物使用频次、分类属性进行分析得出:黄芪(218次)、当归(173次)为最多,以补虚药、活血化瘀药使用频次为最高;同时对临床治疗糖尿病心肌病使用的中药的性味、归经等进行统计,得出温性药、苦味药使用居多,用药归经以肝、脾、心为主;对277首处方中用药频次≥20次的所有药物进行聚类分析与关联规则分析,发现导师临床治疗DCM用药规律,得出导师常用核心药对:黄芪当归药对。2.通过体内实验造模及中药组、二甲双胍组干预,发现黄芪当归药对可以改善模型组一般情况、血糖血脂相关指标、超声心动图心脏血流以及心肌形态学等,证实了黄芪当归药对对于改善糖尿病心肌病的有效性;3.通过体外实验筛选出中药组、模型组、二甲双胍组的最佳干预时间(72h)、最佳浓度(黄芪甲苷:100umol/l,阿魏酸:20umol/l,二甲双胍:200umol/l)、中药组最佳配比(1∶1),行ELISA及Westernblot相关指标检测,可知:药物干预组可明显降低NF-κB通路相关指标(NF-κB、IL-6、TNF-α、MCP-1)的蛋白表达;4.进行基因测序,对差异表达基因进行富集化分析,得出14个高差异表达miRNA,同时进一步使用生物信息学方法挖掘,预测与NF-κB信号通路关系最为密切的靶基因miRNA-4508,提示其可能与干预糖尿病心肌病炎症反应的NF-κB通路有一定的相关性。
结论:
1.糖尿病心肌病的病理属性为本虚标实,以气虚为本,血瘀为标,治疗应以益气活血法为原则。
2.糖尿病心肌病临床治疗导师常用药物以黄芪最多,药味多为苦味药、辛味药、甘味药为主,药性以温味药居多,归于肝、脾、心经,治疗宜以补虚类、活血化瘀类药物为主,临床常用代表药对为黄芪、当归。
3.黄芪当归及其主要活性成分黄芪甲苷、阿魏酸对于可以通过调控NF-κB通路发挥抗炎作用保护心肌细胞,其作用机制可能与miRNA-4508有一定相关性。