莱克多巴胺因能增强运动员、运动动物肌肉,提高运动成绩,被国际奥委会列为禁用兴奋剂药物。该药同时因具有营养再分配、促进蛋白质合成,增加动物酮体瘦肉率,提高饲料转化率的作用,可能被非法作为饲料添加剂用于畜产品的生产,但其残留对人类健康存在潜在的危害,被禁止或限定在畜产品生产中使用。为了建立一种能快速而有效监测饲料、动物性食品中莱克多巴胺的残留方法,本研究用混合酸酐法将莱克多巴胺与牛血清白蛋白偶联,制备成全抗原后免疫Balb/c小鼠,用杂交瘤技术建立了一株能稳定分泌抗莱克多巴胺单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为3E₁-C₉-E₁₀,并对此细胞进行了鉴定和抗体应用的初步研究。 3E₁-C₉-E₁₀抗体的鉴定结果为:抗体属于IgG₁亚类;与多巴酚丁胺的交叉反应率为24%,与沙丁胺醇、克伦特罗没有交叉反应;间接酶联免疫吸附试验测定细胞上清抗体效价为1×10⁵,腹水抗体效价可达1×10⁷以上。秋水仙素阻抑法计数细胞染色体数平均为96,体外传代培养和冻存复苏后分泌抗体稳定。 以3E₁-C₉一E₁₀单抗为基础,建立了间接竞争性抑制ELISA方法,该方法对莱克多巴胺最低检出量为2ng/ml,尿及饲料添加回收率为80%到105%。 与其它方法综合对照最低检出量、效率、精确度、费用等参数可得出用ELISA检测莱克多巴胺残留是一种高效、快捷、可靠的方法,可在实际检测中应用。