甘草各部位甘草皂苷的提取鉴定及生物转化

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本文主要研究了甘草各部位甘草皂苷的提取,并确定了水提法的最佳工艺条件,通过色谱技术对不同部位皂苷成分进行了鉴定。此外还成功筛选出能够转化甘草皂苷生成单葡萄糖醛酸基甘草皂苷的菌种。用水提法分别对甘草的根、茎、叶、种子中的甘草皂苷进行提取,结果显示甘草根中甘草皂苷的含量最高,其次在甘草茎中;但在甘草叶和种子中几乎不含甘草皂苷。同时利用单因素试验确定水提法的最佳工艺条件为:温度100℃,水体积10倍,提取时间1.5 h,提取次数4次,随即根据最佳水提工艺条件分别对甘草的根、茎、叶、种子中的甘草皂苷进行提取,通过HPLC检测,甘草根中甘草皂苷的提取率最高,叶和种子中几乎不含甘草皂苷。甘草根中甘草皂苷粗品提取率为11.3%,为产业化提供了依据。为了能够从实验室现有微生物菌种中筛选出能够表达出β-葡萄糖醛酸酶的菌种,实验以甘草为诱导物,成功筛选出能够转化甘草皂苷生成单葡萄糖醛酸基甘草皂苷的霉菌:Absidia.sp.GC3。此外针对该菌分别对最佳诱导物、诱导物剂量、最佳培养时间进行探究,并测定了最佳酶反应时间。最终确定甘草为最佳诱导物,诱导物计量为20%,最佳培养时间为7天,最佳酶反应时间为12 h。另应用硫酸铵沉淀法从猪肝、羊肝、牛肝中提取酶液并对甘草皂苷进行转化,经反应发现猪肝中β-葡萄糖醛酸酶活力最强,并高于其他动物肝脏所提出的酶液,并确定最佳酶反应时间为6 h。
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