【摘 要】
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第一部分子痫前期患者血清差异蛋白的筛选目的:子痫前期是妊娠期严重的并发症,是造成早产、新生儿死亡的主要原因之一,目前的发病机制尚不明确。本研究应用同位素标记的绝对-相对定量技术(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)对血清进行质谱和相对定量分析,筛选出子痫前期患者血清差异表达蛋白,初步探讨差异表达蛋白与子痫前期的关系。
【基金项目】
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项目名称:应用iTRAQ技术筛选子痫前期孕妇血清生物标志物及建立诊断模型的研究,项目合同编号:2015GXNSFAA139191,项目来源:广西自然科学基金,项目起止时间:2015年-2018年
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第一部分子痫前期患者血清差异蛋白的筛选目的:子痫前期是妊娠期严重的并发症,是造成早产、新生儿死亡的主要原因之一,目前的发病机制尚不明确。本研究应用同位素标记的绝对-相对定量技术(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)对血清进行质谱和相对定量分析,筛选出子痫前期患者血清差异表达蛋白,初步探讨差异表达蛋白与子痫前期的关系。方法:选取2018年3月至2018年7月在广西医科大学第一附属医院就诊的孕妇12例,其中子痫前期组7例,正常对照组5例。收集血清进行蛋白质提取、去除高丰度蛋白、胰酶酶解、iTRAQ试剂标记、高效液相色谱-质谱检测,在Uni Prot KB/Swiss-Prot蛋白质序列数据库搜索,鉴定出血清差异表达蛋白,并进行一次技术重复实验,取两次实验有交集的差异蛋白为最终结果。同时对差异蛋白进行生物信息学分析,包括GO功能分类与富集、KEGG通路富集、富集聚类分析、蛋白质相互作用网络分析。结果:(1)两次iTRAQ实验的重现性检验为:子痫前期组相关系数r=0.59,对照组的相关系数r=0.87,P0.05)。(2)子痫前期血清中PSG2的表达高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)血清中α1-AT在子痫前期组表达降低,ELISA结果与iTRAQ实验结果下调的趋势一致,但差异无统计学意义,因此α1-AT在子痫前期中的作用仍需进一步证实。(2)子痫前期患者血清中PSG2的表达升高,ELISA结果与iTRAQ实验结果一致,PSG2的表达异常可能与子痫前期的发病有关。
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