蓝藻抗病毒蛋-N（Cyanovirin-N,CVN）是一种具有碳水化合物结合能力的凝集素,有极高的抑制囊膜病毒的活性。研究表明,CVN的作用机制是通过其与病毒囊膜富含甘露寡糖的糖蛋白的高亲和性结合,阻止病毒与宿主细胞的吸附及侵入环节,从而抑制病毒的感染。面对病毒的暴发威胁,我们急需开发CVN这种有效的抗病毒药物。由于CVN结构特殊,分子量11kDa且含有两个二硫键,使它在异源宿主中表达是一个挑战,并且表达产物存在结构不完整、活性低、产量低、不利于纯化等问题。本研究根据大肠杆菌密码子偏爱性优化设计合成了CVN基因,并在CVN的N端融合了本实验室已证实具有促溶效果的CL7标签,将其克隆到大肠杆菌表达载体p ET28a中,得到pET28a-CL7-CVN重组表达质粒,然后转化至大肠杆菌Rosetta（DE3）中诱导表达。通过对诱导培养条件的优化,重组表达质粒p ET28a-CL7-CVN在最佳诱导条件下（诱导温度18℃,0.5mM IPTG,诱导时间16h）高效可溶性表达,可溶性表达量约占总可溶蛋白的30%。由于表达的CL7-CVN具良好的热稳定性,我们通过热水浴处理除去大部分杂蛋白,经一步NiNTA亲和层析和HRV 3C蛋白酶对融合蛋白的酶切过程,可实现CVN的快速纯化,该方法简化了CVN的纯化步骤,缩短了工艺流程,极大的降低了CVN的生产成本。结果证实,我们从1g表达细胞中可纯化到10mg以上的CVN蛋白,纯度可达99%以上。进一步通过体外抗病毒活性实验,表明纳摩尔浓度的CVN蛋白就可获得很好的抑制伪狂犬病毒（Pseudorabies virus,PRV）的效果;同时,鉴于CVN蛋白高亲和性结合囊膜病毒的特性,我们还探讨建立了一种基于CVN富集检测囊膜病毒的方法,初步结果表明该方法富集病毒的效率可达97.32%。因此,本研究中探讨的高效表达纯化CVN蛋白的方法及建立的富集检测病毒的方法,可为开发新型有效的抗病毒药物及建立高灵敏度的病毒检测方法用于病毒感染早期诊断奠定了坚实的理论基础和提供科学的参考。