U6/H1双启动子siRNA表达载体的构建及可诱导的随机siRNA编码质粒文库的建立

来源 :中国协和医科大学 中国医学科学院 北京协和医学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yhmlivefor50
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  中文摘要RNA干扰(RNAi)是双链RNA介导的、序列特异的转录后基因沉默现象,RNAi能高效特异地阻断基因的表达,自1998年被发现以来已经成为研究基因功能的理想工具。siRNA是RNAi过程中的21nt~23nt的小干扰RNA,是RNAi产生效应的中介分子。本文构建了一种可用于哺乳动物细胞的siRNA表达载体,克服了发夹结构siRNA表达载体或含有同向并排两个启动子的siRNA表达载体所存在的局限性。利用这一载体可以更加经济方便地构建任何针对靶基因的siRNA表达质粒。另外,我们将这种载体改造为可诱导的形式,从而可以控制siRNA的产生,并利用这一可诱导的载体建立了一个完全随机的siRNA文库,将有助于在哺乳动物细胞中大规模的功能基因筛选。
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